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  • 本发明公开了一种Map3k1Map3k1基因突变导致睾丸发育障碍的小鼠模型的构建方法及应用。本发明基于CRISPR/Cas9系统设计构建能够特异性识别Map3k1Map3k1基因的sgRNA和同源重组载体,并将其注入小鼠受精卵中,然后将受精...
  • 本发明属于生物医学技术领域,具体涉及一种结节性硬化病小鼠动物模型,并进一步公开其构建方法与应用。本发明所述结节性硬化病小鼠动物模型,通过敲除Tsc1基因和NPRL2基因构建小鼠模型。本发明所述结节性硬化病小鼠动物模型,不仅小鼠存活时间与正常...
  • 本发明涉及蛋白纯化技术领域,提供一种通过HEK293细胞真核纯化α‑syn A53T蛋白的方法。构建含SNCA‑A53T突变目的片段的重组表达质粒,插入亲和标签,转入大肠杆菌并且扩增表达,获得用于转染的无内毒素超螺旋质粒;接种HEK293细...
  • 本发明公开了一种胰腺组织特异性表达的重组腺相关病毒载体及其应用,属于生物医药技术领域。包括如下步骤:S1、胰腺特异性启动子克隆:Ins2与Pdx1启动子联合使用,制备Pdx‑1/Ins2启动子;血清型和衣壳突变优化;S2、外源基因表达盒插入...
  • 本发明涉及基于嗅觉受体OLFR205的小分子诱导型AAV基因表达系统及其应用。基于嗅觉受体OLFR205的小分子诱导型AAV基因表达系统,包括AAV载体一和AAV载体二,其中,AAV载体一表示为:ITR‑PSV40SV40‑Olfr205‑...
  • 本申请涉及携带Prrg3基因表达框的病毒载体及其在治疗疾病中的用途。具体地,本申请涉及一种Prrg3基因表达框、携带Prrg3基因表达框的病毒载体及其在治疗心力衰竭、心肌肥厚、高血压、超重、肥胖症、糖尿病、脂肪肝、或高血脂症等疾病中的应用,...
  • 本发明涉及包含Plaur基因的载体及其在神经损伤相关疾病中的应用。本发明证实通过AAV病毒载体增强Plaur基因的表达,能够显著增强神经元轴突再生能力,并提高神经再生的效率。这一效果在视神经损伤模型中得到了验证。本申请为神经保护和神经再生提...
  • 本发明公开了一种SLFN14蛋白的重组表达与纯化方法。本发明提供了一种提高SLFN14蛋白表达量和/或稳定性的方法,包括如下步骤:A1)将SLFN14蛋白氨基酸序列第365, 775, 808位的半胱氨酸均突变成丝氨酸,且第211位的谷氨酸...
  • 本发明公开了一种治疗2型糖尿病的间充质干细胞、制备方法及应用。属于生物技术领域。本发明首先从脐带组织中分离间充质干细胞,随后采用优化的离心增强法将携带Glymaxylin基因的慢病毒载体高效转导至细胞中。所述转导过程在特定转导增强剂下进行,...
  • 本发明公开了一种基于假病毒的病毒气溶胶实验系统,包括制备表达绿色荧光蛋白的慢病毒载体;将所述表达绿色荧光蛋白的慢病毒载体加入PBS溶液中得到病毒气溶胶发生液并加入气溶胶发生器,以含1%胎牛血清的DMEM培养基作为气溶胶采集液放入液体撞击式气...
  • 本发明涉及细胞免疫治疗技术领域, 具体涉及一种在隔离器中利用健康人外周血分离并经冻存的PBMC制备自体CD19 CAR‑T细胞的方法,本方法在C级隔离器内进行,首先,从健康人外周血分离并冻存PBMC,复苏后,使用含DNA酶的完全培养基‑A静...
  • 本发明公开了一种Klf6基因敲除的小鼠胚胎模型的构建方法,包括如下步骤:S1、利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,制备包含Cas9酶和用于靶向小鼠Klf6基因的第三和第四外显子区域的sgRNA的基因编辑液;S2、取出小鼠受精卵,用基因编...
  • 本发明公开了一种内质网应激响应性基因调控平台及其应用。所述内质网应激响应性基因调控平台包括:IRE1可切割发夹基元和基因调控单元;所述基因调控单元包括脱氧核酶、反义寡核苷酸、mRNA疫苗、CRISPR系统或RNAi系统中的任意一种。本发明的...
  • 本发明公开了CTL‑S1CTL‑S1基因及miR‑let‑7在调控瓜实蝇生殖发育中的应用。CTL‑S1CTL‑S1基因在瓜实蝇卵巢特异性高表达,通过RNA干扰抑制CTL‑S1CTL‑S1基因的表达可降低后代的孵化率。通过RNA免疫共沉淀的双...
  • 本发明提供了一种基于CRISPRa的基因编辑微球及其制备方法与应用,属于生物医药技术领域。本发明人创新性地揭示了衰老因子上调和老年BMSCs成骨能力下降,是由肿瘤坏死因子α诱导蛋白3(TNFAIP3,A20)密切调控的。因此,本发明采用微流...
  • 本发明属于生物医药技术领域,具体涉及心脏中特异性敲除PHPT1的非人动物的构建方法及其应用,以及降低PHPT1在治疗和/或预防脓毒性心肌病中的应用。本申请通过敲除PHPT1有效降低心肌细胞中CKMB含量,提高心肌细胞活性,可以用于治疗和/或...
  • 本发明公开一种IER2‑FlagIER2‑Flag基因敲入小鼠模型的构建方法及其应用,所述构建方法包括:确定小鼠待敲入IER2IER2基因的靶位点,设计sgRNA,序列如SEQ ID No : 2所示;退火形成的双链sgRNA与CRISPR...
  • 本发明公开了一种IER2‑T2A‑EGFPIER2‑T2A‑EGFP基因敲入小鼠模型的构建方法及其在髓系细胞分选中的应用,该方法包括:针对小鼠IER2IER2基因的敲入靶点,设计sgRNA,序列如SEQ ID No : 2所示;以构建的PX...
  • 本发明公开一种IER2IER2基因敲除小鼠模型的构建方法及其在牙齿矿化研究中的应用,所述构建方法包括:确定小鼠待敲除基因的靶位点,设计2个sgRNA,序列如SEQ ID No : 2~3所示;退火形成的双链sgRNA与CRISPR‑Cas9...
  • 本发明涉及聚合硫酸铁技术领域,具体涉及一种高效聚合硫酸铁生产方法。所述高效聚合硫酸铁生产方法,包括以下步骤:(1) 制备微生物粒子;(2) 制备增效剂;(3) 采用微生物粒子以七水合硫酸亚铁为原料进行氧化,亚铁离子转化率≥99.5%后,磁分...
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