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  • 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种基于永生化牛乳腺上皮细胞制备人源溶菌酶外泌体融合蛋白的方法及其应用。所述方法包括:获取与纯化原代牛乳腺上皮细胞;转染hTERT基因构建永生化细胞系;构建含CD47锚蛋白与人源溶菌酶融合基因的表达质粒;将质...
  • 本发明通过“结构解析‑定点突变‑功能验证”途径揭示了普鲁兰酶PulA活性架构中关键氨基酸的作用机制,并获得了兼具高催化效率的突变体酶,为工业化淀粉加工酶资源的开发提供了新方向。本发明成功获得纯化的突变蛋白,N98D将野生型的酶活提高到了29...
  • 本发明公开了一种免疫球蛋白G降解酶的发酵制备工艺,涉及生物发酵技术领域。本发明在补料培养基中引入的乳糖与微量IPTG作为诱导前体组合,乳糖营造诱导准备状态;同时微量IPTG作为超效诱导剂,缓解了外源蛋白高强度表达对宿主细胞造成的瞬时代谢冲击...
  • 本发明公开了一种重组A型肉毒毒素的制备方法及其应用,其目的是利用本发明提供的重组A型肉毒毒素制备方法可工业化生产重组A型肉毒毒素。首先通过基因工程手段构建能够在宿主菌中异源表达A型肉毒毒素基因的基因工程菌,再利用基因工程菌通过高密度发酵在菌...
  • 本发明公开了用于心血管溶栓的阿替普酶突变体及其制备方法,涉及生物医药技术领域,包括所述突变体的氨基酸序列是在野生型人组织型纤溶酶原激活剂(tPA)的氨基酸序列(SEQ ID NO : 1)基础上进行如下修饰得到:第85位的苯丙氨酸被替换为色...
  • 本发明提供了一种酶活和热稳定性同步提高的蛋白质谷氨酰胺酶突变体及其应用,属于基因工程和酶工程领域。本发明通过对金黄杆菌来源蛋白质谷氨酰胺酶PG3的编码基因进行分子改造,获得了一系列突变体MT1‑MT6。与野生型相比,其中突变体MT6的最佳催...
  • 本发明提供了基于蛋白质谷氨酰胺酶制备减盐、增鲜和去腥鱼蛋白凝胶产品的应用,属于食品加工领域。本发明通过异源表达技术大量制备了金黄杆菌来源的蛋白质谷氨酰胺酶PG3,并利用所述蛋白质谷氨酰胺酶PG3对花鲢MP进行酶法脱酰胺修饰,最后将脱酰胺后的...
  • 本发明提供了一种蛋白质谷氨酰胺酶突变体及其编码基因和应用,属于基因工程和酶工程领域。本发明中通过对噬几丁质菌蛋白质谷氨酰胺酶PG5的编码基因进行分子改造,获得了一系列突变体MT1‑MT8。与野生型相比,突变体的最佳催化温度提高了5℃,比活力...
  • 本发明涉及一种金黄杆菌来源蛋白质谷氨酰胺酶PG3、编码基因及其应用,属于生物基因工程技术领域。本发明所述的蛋白质谷氨酰胺酶PG3的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,其编码基因的cDNA序列如SEQ ID No.2所示。通过大肠杆菌表达...
  • 本发明属于酶催化领域,具体涉及一种酰胺水解酶突变体、固化酶、编码基因、表达质粒及其制备方法和在催化酰胺水解中的应用,其中,酰胺水解酶的突变体,其特征在于:为具有在SEQ ID NO.1所示的野生氨基酸序列中存在L85Y、E209R中的至少一...
  • 本发明公开了一种高热稳定性L‑苏氨酸醛缩酶突变体及其合成屈昔多巴的方法,属于生物催化工程领域。本发明提供的高热稳定性L‑苏氨酸醛缩酶突变体,可高效催化屈昔多巴的生成,实现了L‑苏氨酸醛缩酶的异源高效表达。通过序列保守性分析,溶剂化自由能预测...
  • 本发明公开了一种桉叶素合成酶突变体及其在生产桉叶素中的应用,属于生物工程技术领域。本发明通过将桉叶素合成酶的第311位的缬氨酸突变成异亮氨酸,第418位的甘氨酸突变为丙氨酸,并在粘质沙雷氏菌(HBQA7)中过表达,构建得到工程菌株HW14。...
  • 本发明属于基因工程领域,具体涉及BcGLOA蛋白在调控B型单端孢霉烯族毒素中的应用,所述BcGLOA蛋白可以降低植株中B型单端孢霉烯族毒素的积累,使作物籽粒中B型单端孢霉烯族毒素的积累量减少。本发明基于对B型单端孢霉烯族毒素的解毒以降低作物...
  • 本发明公开了一种苯丙氨酸解氨酶突变体及其在合成4‑溴‑L‑苯丙氨酸中的应用,属于生物技术领域。本发明的苯丙氨酸解氨酶突变体是在SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列的基础上发生突变获得的,该苯丙氨酸解氨酶突变体的突变位点包括:第173位、第...
  • 本发明公开了一种麦角硫因三甲胺裂解酶突变体及其在检测唾液中组氨酸甜菜碱中的应用。麦角硫因三甲胺裂解酶催化L‑组氨酸甜菜碱水解为尿刊酸,通过比色法检测290 nm处的尿刊酸吸光值,可确定唾液中L‑组氨酸甜菜碱的含量。该方法灵敏度高,1.5小时...
  • 本发明属于基因工程的技术领域,公开了一种肌醇‑3‑磷酸合酶突变体和肌醇的制备方法。本发明提供的肌醇‑3‑磷酸合酶突变体相较于SEQ ID NO : 1所示的氨基酸片段包括在第132位、第181位、第211位和第324位中的一个或多个位点发生...
  • 本发明的课题在于提供一种通过简便操作而制造不含有核酸的葡萄糖异构酶的方法。本发明是葡萄糖异构酶的制造方法,其特征在于,将葡萄糖异构酶生产菌进行液体培养后,对培养肉汤在45℃~95℃进行1分钟~60分钟的加热处理,接着进行菌体细胞壁破碎处理。
  • 本发明属于光敏酶膜反应器技术领域,特别涉及一种基于2‑甲基咪唑调控的过渡金属基卟啉光敏酶膜反应器及其制备方法和应用。所述卟啉光敏酶膜反应器包括掺杂2‑甲基咪唑的过渡金属基卟啉光敏膜以及负载在所述光敏膜上的光脱羧酶,其中,所述掺杂2‑甲基咪唑...
  • 本发明提供基于磁性载体固定化α‑淀粉酶及其南瓜籽源α‑淀粉酶抑制剂高效筛选方法。固定化α‑淀粉酶,是以磁性金属有机骨架材料Fe3O4@SiO2@NH2‑MIL‑125为载体,固定化α‑淀粉酶制得的固定化酶,本发明通过多重修饰实现酶的高效固载...
  • 本发明公开了一种氯离子响应‑复合菌群双壳微胶囊,自表及里包括依次设置的氯离子响应外壳层、外层细菌‑营养芯材、内层缓释壳层和内层营养芯材;其中,氯离子响应外壳层的原料包含第一响应水凝胶材料和LDHs;外层细菌‑营养芯材包含丙烯酸树脂包覆的细菌...
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