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  • 本发明涉及L‑异亮氨酸生产能力得到提高的短杆菌属或棒状杆菌属微生物及利用其的L‑异亮氨酸的生产方法,上述短杆菌属或棒状杆菌属微生物固有的乙酰乳酸合成酶的活性弱化或失活,同时变为具有外来的乙酰羟酸合成酶Ⅱ的活性,从而与亲本菌株相比,副产物产生...
  • 本发明提供一种抗肿瘤肽修饰的细菌外膜囊泡及其制备方法,涉及工程化细菌外膜囊泡技术领域。本发明设计并构建了可在原核生物中表达ClyA‑A25融合蛋白的重组质粒,利用该重组质粒成功制备了抗肿瘤肽A25修饰的工程化细菌外膜囊泡W‑A25OMV。所...
  • 本发明属于微生物工程及基因工程技术领域,公开了一种生产谷氨酸族氨基酸的大肠杆菌及其构建方法和应用。所述大肠杆菌的含有甲基异柠檬酸裂解酶基因prpB的生长依赖型启动子PprpB和/或鸟氨酸逆向转运蛋白/赖氨酸通透酶基因ydgI的稳定期依赖型启...
  • 本发明属于生物催化和生物制药领域,具体涉及一种重组工程菌株TRP‑3及其在褪黑素合成中的应用。本发明利用基因组编辑手段构建高产L‑色氨酸的大肠杆菌菌株BL21(ΔtnaA/ΔtrpR/ΔTyrA/ΔpheA/ΔTrpL),并以该菌株为底盘细...
  • 本发明属于生物催化和生物制药领域,具体涉及一种重组工程菌株TRP‑2及其在血清素合成中的应用。本发明利用基因组编辑手段构建高产L‑色氨酸的大肠杆菌菌株BL21(ΔtnaA/ΔtrpR/ΔTyrA/ΔpheA/ΔTrpL),并以该菌株为底盘细...
  • 本发明属于基因工程技术领域,提供了Hsp60受体靶向型重组植物乳杆菌及构建方法与应用,以植物乳杆菌为宿主,以pPG612为表达载体,表达CsgB基因或CsgF基因。两株工程益生菌均可表达靶标蛋白并可稳定表达于菌体表面,有效黏附AB.9肠上皮...
  • 本发明属于细胞培养技术领域,具体涉及一种细胞培养支架及其制备方法和应用。本发明提供的制备方法,包括以下步骤:将生物相容性材料进行3D打印,得到微米级支架;将生物相容性材料在微米级支架表面进行静电纺丝,得到微纳米级双尺度支架;将所述微纳米双尺...
  • 本发明提供一种用于细胞保护的细胞膜衍生纳米囊泡层及其制备方法与应用,属于生物医药技术领域。所要解决的技术问题为现有细胞保护方法存在环境敏感性高、细胞毒性强及抑制细胞增殖等缺陷,技术方案要点为:提取哺乳动物细胞的细胞膜衍生纳米囊泡,通过PCR...
  • 本发明公开了一种干黄连细胞外囊泡的提取方法,包括以下步骤,步骤1:将干黄连取出,用自来水洗净沙土,用磷酸盐缓冲溶液浸没干黄连24 h;步骤2:将步骤1中的黄连去皮后用榨汁机榨汁并过滤;步骤3:利用差速离心法对步骤2中的滤液进行处理,得到干黄...
  • 本发明公开了一种适用于梨果发育阶段的石细胞高纯度分离方法,选取盛花期后30天的梨幼果果肉组织,经冷冻研磨处理后,使用0.5mM HCl进行低温预处理,破坏果胶连接,削弱细胞间黏合力;随后加入果胶酶,在温和条件下进行选择性酶解,去除石细胞表面...
  • 本发明公开一种基于避光与酶解优化的梨原生质体高产高活提取方法,该方法以生长30‑40天的梨组培苗叶片或田间梨嫩叶为提取材料,采用酶解液进行酶解处理和原生质体纯化,获得原生质体;所述的梨组培苗酶解前,整株置于黑暗环境中,在25±2℃下避光预处...
  • 本发明公开了一种葡萄原生质体的分离及转化方法,属于原生质体分离转化技术领域。该方法以葡萄愈伤组织为材料,开发出一种全年可行、效率高、产量大的原生质体制备技术。与现有技术相比,利用葡萄愈伤组织可持续稳定地获取大量高活力的原生质体,不仅操作简便...
  • 本发明涉及DNA纳米技术领域,公开了一种利用DNA四面体框架核酸特异性锚定分选原生质体的方法,如下:PCR反应合成胆固醇功能化的DNA四面体框架核酸;酶解获得高活性原生质体;将DNA四面体框架核酸与MMG缓冲液混合均匀后加入原生质体重悬液,...
  • 本发明属于植物干细胞培养技术,具体公开了一种组培白芍根部干细胞分离和培养方法。该方法包括:对外植体进行低温与蓝光预处理;使用特定添加剂组合物(含海藻寡糖、茉莉酸甲酯、谷胱甘肽、水杨酸、抗坏血酸、一氧化氮供体SNP等)的WPM培养基进行诱导培...
  • 本发明公开了一种RSPO3重组蛋白、对虾细胞体外增殖培养用培养基及其培养方法,增殖为对虾细胞体内增殖或对虾细胞体外增殖;RSPO3重组蛋白对应的核苷酸如序列SEQ ID NO.1所示,RSPO3重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所...
  • 本发明提供了高耐逆性的胰岛类器官及其制法和应用。具体地,本发明提供了一种制备胰岛类器官的方法;本发明还提供了一种包含(a)胰岛类器官和(b)式I化合物或其药学上可接受的盐的试剂组合的用途。本发明揭示了在式I化合物或其药学上可接受的盐的存在下...
  • 本发明属于生物材料技术领域,具体涉及一种基于3D打印技术构建的黄褐斑皮肤类器官病理模型及其构建方法与应用。所述模型通过三层仿生结构,具有高度的解剖还原性,能够实现黑素细胞在基底层的梯度定位,并保持其长期功能,突破了传统模型难以维持黑素细胞功...
  • 本发明提供了一种诱导干细胞分化为胰岛素分泌细胞的诱导剂,包括A组分和B组分;A组分由以下质量浓度配比而成,25‑45mg/L的桂皮鞣质B1、5‑10mg/Lβ‑甘油磷酸钠、8‑12mg/L对乙酰氨基酚和10‑20g/L组合物;B组分由以下质...
  • 本发明公开了用于促进血管新生的血管类器官来源外泌体的制备方法及其应用,本发明基于具有三维血管网络的血管类器官制备外泌体,无需外源刺激,操作简便,产量稳定,可适用于工业化规模生产;并且本发明首次将基于血管类器官所制备的外泌体应用于对糖尿病血管...
  • 本发明涉及类器官培养技术领域,尤其涉及一种肺芽类器官的构建方法及应用。包括:S1.对废弃的原代肺组织进行纯化分选,得到Ⅱ型肺泡细胞;S2.对所述Ⅱ型肺泡细胞进行平面培养,得到肺芽上皮样细胞;S3.对所述肺芽上皮样细胞进行三维培养,得到肺芽类...
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