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  • 本发明提供了一种高效制备高纯度唾液酸乳糖‑N‑四糖a的重组大肠杆菌的构建方法及应用。本发明通过在大肠杆菌BL21(DE3)基因组中精准整合编码β‑1, 3‑N‑乙酰葡萄糖胺基转移酶、β‑1, 3‑半乳糖基转移酶和α‑2, 3‑唾液酸糖基转移...
  • 本发明为一种外泌体提取纯化的组合及其制备方法,主要包含以下物质:聚乙二醇PEG与葡聚糖,将聚乙二醇PEG与葡聚糖在水溶液中形成不相容的双水相系统,外泌体选择性分配至含聚乙二醇PEG的上相,杂质溶于含葡聚糖的下相,从而实现外泌体的高回收率和高...
  • 本发明属于纳米生物技术领域,具体公开了沙棘来源细胞外囊泡及其制备方法和应用,制备方法如下:取沙棘原浆进行离心,去除上层油相;吸取的中层水相离心,去除上层油相;吸取中层水相离心;弃去上层油相,弃去中层水相,并使用缓冲液充分重悬沉淀并离心,保留...
  • 本发明属于植物组织工程技术领域,具体涉及一种从植物培养物及植物培养基中获得植物细胞外囊泡的方法及应用。本发明提供的从植物培养物及培养基中提取细胞外囊泡的方法,主要包括愈伤组织诱导、继代培养、悬浮培养、预处理、粗提及纯化等步骤。核心优势在于:...
  • 本发明属于生物技术与水产养殖领域,尤其涉及一种基于瓦氏黄颡鱼低氧诱导肝脏细胞外囊泡提高其耐低氧能力的方法,采用差速离心与高精度碘克沙醇密度梯度离心相结合的方法提取经过低氧处理的瓦氏黄颡鱼肝脏组织中的高纯度细胞外囊泡EVs;使用PBS将提取的...
  • 本申请公开一种大规模冷冻保存动物细胞的方法:将待保存细胞在基质胶的支持下进行第一阶段扩增;将完成第一阶段扩增的待保存细胞在微载体的支持下进行第二阶段扩增;将所述待保存细胞与无血清冻存液混合后制成微囊悬液;将所述微囊悬液置于冻存容器中实施冷冻...
  • 本申请涉及细胞生物学技术领域,具体公开了一种原代睑板腺上皮细胞的分离培养方法及其得到的原代睑板腺上皮细胞与应用。所述方法包括:采用特定配比的Ⅰ型胶原酶、分散酶和胰蛋白酶组成的复合消化液对睑板腺组织进行高效温和消化;用含血清中和液中止消化并收...
  • 雄烯二酮调控MSMO1表达在猪卵巢颗粒细胞中的应用,所述的应用具体是在调控猪卵巢颗粒细胞的增殖、凋亡和/或E22、Pg分泌中的应用。本发明筛选出了40nM雄烯二酮为猪卵巢颗粒细胞最适宜的生长浓度;添加40nM雄烯二酮对猪卵巢颗粒细胞增殖和E...
  • 本发明涉及呼吸系统疾病体外模型技术领域,尤其是涉及一种慢性阻塞性肺疾病体外模型的构建方法与应用。本发明涉及一种培养基添加剂组合物,其包括脂多糖(LPS)、香烟烟气提取物(CSE)以及猪胰弹性蛋白酶(PPE),以及来源于哺乳动物肺组织的精准肺...
  • 本发明提供一种黄唇鱼鳃丝细胞系的建立方法及其应用,所述的细胞系的保藏编号为CGMCC No.46720。本发明建立的黄唇鱼鳃丝细胞系具备良好的遗传稳定性,已实现100代以上连续传代。基因转染实验验证了该细胞系对外源基因的高效转入与表达能力,...
  • 本发明属于生物医学工程技术领域,具体涉及一种基于乳液分离的外泌体提取方法,包括如下步骤:将含有外泌体的生物样本、有机试剂、表面活性剂混合后进行高速机械混合得到乳液,恒温搅拌一段时间后施加电场处理,处理后的乳液离心保留水相,对水相中的外泌体进...
  • 本发明涉及细胞培养技术领域,具体公开了用于观察成牙本质细胞极性的体外分层培养模型构建方法,所述方法包括提取下颌切牙颈环组织,分离牙源性上皮组织与牙乳头组织;将牙源性上皮组织与牙乳头组织分别消化为单细胞悬液;将上皮细胞接种于可移动的聚己内酯膜...
  • 本申请涉及一种在无饲养层且无异源的条件下衍生人胚胎干细胞 (hESC) 系的方法。
  • 本发明属于生物技术领域,公开了在3D悬浮培养条件下人胚胎干细胞来源的可扩增多面极化成熟肝细胞类器官分化方法的建立和应用。本发明提供一种培养基,所述培养基为包括以下组分的基础培养基:血清、非必需氨基酸、谷氨酰胺、青霉素‑链霉素、烟酰胺、GSK...
  • 本发明提供了内皮素在卵母细胞体外成熟及胚胎体外培养中的应用。本发明发现内皮素的新用途,其可以提高体外成熟后的卵母细胞极体排出率,促进胞质成熟,提高成熟后细胞器的正常排布比例,并且对提高卵母细胞受精有一定的促进,同时促进后续囊胚发育。本发明还...
  • 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种改善体外成熟卵母细胞端粒长度及成熟质量的方法及应用,所述制剂中含有下述组分至少之一:Sema3类蛋白;瑞香素。本发明的制剂,通过添加Sema3类蛋白和瑞香素中的至少一种,从而有效维持、修复或延长卵母细胞及...
  • 本发明涉及动物繁殖技术领域,尤其涉及一种冷冻猪精液的解冻方法。解冻方法是将实心钢珠小球置于可加热器皿中,而后将实心钢珠小球加热至37℃~60℃,再将冷冻猪精液细管插入并浸没于实心钢珠小球中保持12s~30s。本发明提供了一种冷冻猪精液的解冻...
  • 本发明涉及一种三维打印骨类器官的方法和应用,属于三维打印技术领域,本发明提供了一种三维打印骨类器官用材料组合物,所述材料组合物包括生物墨水、成骨细胞和破骨细胞,所述成骨细胞和破骨细胞的数量比为1 : 2‑3.5。同时本发明提供了利用所述材料...
  • 本发明公开了一种髓核细胞及其制备方法与应用,属于生物医药技术领域。该方法包括:从永生化的球形髓核细胞中收集外泌体,将其用于髓核细胞的培养,培养后的髓核细胞具有更强的增殖能力,实现了髓核细胞在体外大规模扩增;同时培养后的髓核细胞具有更强的细胞...
  • 本申请公开了一种功能性外泌体及其制备方法与应用,属于生物医药技术领域。该外泌体高表达miR‑124‑3p和miR‑10a‑5p,前者可以通过抑制ROCK1等信号分子从而抑制细胞外基质的降解,促进细胞外基质重塑;而后者可以靶向抑制促炎因子受体...
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