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提高基因敲入效率的载体及验证基因精准敲入效率的方法
本发明涉及提高基因敲入效率的载体及验证基因精准敲入效率的方法,该载体包括基因敲除载体、辅助敲入载体和供体模板载体;基因敲除载体包括sgRNA和敲除载体骨架,sgRNA包含与目的基因互补的序列,骨架包含编码Cas蛋白的序列,具有切割活性;辅助...
一种全脑神经细胞核表达NEMOs钙离子指示剂斑马鱼品系及构建方法
本申请涉及神经科学钙成像技术领域,涉及一种全脑神经细胞核表达NEMOs钙离子指示剂斑马鱼品系及构建方法。该方法将NEMOs质粒、LSSmCrimson质粒和Tol2 mRNA显微注射到斑马鱼鱼卵中,培养后通过红色荧光观察和刺激下的绿色荧光观...
一种以线性化PEI为转染试剂的高产CHO-K1瞬时转染方法
本发明公开了一种以线性化PEI为转染试剂的以线性化PEI为转染试剂的高产CHO‑K1瞬时转染方法。通过置换培养基、零孵育复合物、特定DNA比例及温度调控,在10天内使抗体滴度达到约1 g/L,显著降低表达载体用量并缩短研发周期,适用于抗体药...
一种Fos基因的过表达载体、过表达Fos的CHO细胞系及其构建方法
本申请公开了一种Fos基因的过表达载体、过表达Fos的CHO细胞系及其构建方法,涉及基因工程技术领域,包括由Fos构建的PB513B‑Fos‑Myc‑T2A‑Puro质粒载体和能够过表达Fos制备的CHO‑Fos细胞系;所述过表达载体包含密...
一种提高鱼类抗逆性的方法
本发明属于鱼类育种技术领域,公开了一种提高鱼类抗逆性的方法。本发明利用Tol2转座子系统将pmpcbpmpcb基因转入斑马鱼中,提高Pmpcb蛋白的表达水平,获得稳定遗传的Tg(gfapgfap:pmpcbpmpcb)转基因斑马鱼;在正常养...
CAG启动子特异驱动LSL-RCAN1-P2A-EGFP-Flag tag表达动物模型构建方法及应用
本发明提供了一种CAG启动子特异驱动LSL‑RCAN1‑P2A‑EGFP‑Flag tag表达动物模型的构建方法及应用。通过将CAG启动子序列、LSL序列、RCAN1基因编码序列、EGFP序列、Flag tag序列及PolyA序列插入到小鼠...
Nphs1启动子特异驱动表达的CRE酶动物模型构建方法及应用
本发明提供了一种Nphs1启动子特异驱动表达的CRE酶动物模型的构建方法及应用。利用CRISPR‑Cas9系统将donor质粒中Nphs1启动子序列、CRE 酶基因编码序列及PolyA序列插入到小鼠基因组H11位点中,从而实现小鼠足细胞特异...
GSE3.1蛋白及其编码基因在调控水稻种子粒长、粒宽、粒重中的应用
本发明涉及水稻基因工程领域,公开了GSE3.1蛋白及其编码基因在调控水稻种子粒长、粒宽、粒重中的应用。本发明基于CRISPR/Cas9技术对GSE3.1基因进行编辑,利用农杆菌介导法导入粳稻品种中花11 (ZH11),筛选获得敲除突变体。本...
一种农杆菌介导的红豆草遗传转化方法
本发明公开了一种农杆菌介导的红豆草的高效遗传转化方法,属于植物遗传转化技术领域。本发明方法包括以下步骤:(1)红豆草无菌苗的制备、(2)外植体制备、(3)诱导培养、(4)预培养、(5)侵染与共培养、(6)恢复培养、(7)再生培养、(8)生根...
一种利用花药培养与超低温保存技术对转基因水稻T0代进行遗传转化的方法
本发明提供了一种利用花药培养与超低温保存技术对转基因水稻T0代进行遗传转化的方法,属于花药离体培养和作物遗传育种技术领域。本发明所述的方法包括转基因水稻T0代植株花药愈伤诱导、花药愈伤的继代和超低温保存、超低温保存愈伤的解冻恢复培养、花药愈...
一种浮苔的稳定遗传转化方法
本发明公开了一种浮苔的稳定遗传转化方法,所述遗传转化方法包括以下步骤:(1)浮苔叶状体组织粉碎、(2)外植体预培养、(3)侵染及共培养、(4)第一次筛选培养、(5)第二次筛选培养、(6)扩大培养、(7)转化验证。所述遗传转化方法以浮苔的叶状...
一种基于AGPase基因提高猕猴桃抗坏血酸含量的方法
本申请涉及一种基于AGPase基因提高猕猴桃抗坏血酸含量的方法,所述方法通过沉默AGPase基因来提高猕猴桃果实中抗坏血酸的含量。本方法中所述AGPase基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本申请在大量前期研究的基础上,首次阐明了...
水稻OsNAAT2基因及在调控水稻抗稻瘟病性中的应用
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种水稻基因OsNAAT2及在调控水稻抗稻瘟病性中的应用,OsNAAT2基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,CDS序列如SEQ ID No.2所示,编码的蛋白氨基酸序列如SEQ ID No.3所示,...
一种钙传感蛋白ShCBL1基因的应用
本发明提供一种钙传感蛋白ShCBL1基因的应用,属于生物技术领域,所述应用通过在甘蔗或水稻中过表达或超表达ShCBL1基因,以增加在甘蔗或水稻中脯氨酸和超氧化物歧化酶含量、降低丙二醛含量,从而提高耐冷性。研究表明,当ShCBL1在植物中超表...
一种龙脑樟转基因毛状根的诱导方法及其应用
本发明公开了一种龙脑樟转基因毛状根的诱导方法及其应用,所述诱导方法包括以下步骤:S1:采摘龙脑樟顶芽下的第三至第四片的叶片作为外植体;S2:制备发根农杆菌侵染液以及发根农杆菌菌体;S3:将步骤S1采集的叶片置于步骤S2所得发根农杆菌侵染液中...
基因OsSV5及其基因编码的蛋白质在调控水稻种子活力的应用及方法
本发明涉及植物种子生物学与水稻育种领域,特别涉及一种基因OsSV5OsSV5及其基因编码的蛋白质在调控水稻种子活力的应用及方法。基因OsSV5OsSV5在调控水稻种子活力的应用,OsSV5OsSV5基因正调控水稻种子活力,其全基因组序列如S...
条锈菌效应蛋白基因Ps13167或其编码蛋白在调控植物条锈病抗性方面的应用
本发明属于植物基因工程技术领域,具体涉及条锈菌效应蛋白基因Ps13167Ps13167或其编码蛋白在调控植物条锈病抗性方面的应用。本发明利用农杆菌介导的小麦遗传转化体系将条锈菌效应蛋白基因Ps13167Ps13167的沉默片段和全长片段转化...
玉米Zm00001d028750基因在调控籽粒性状中的应用
本发明公开了玉米Zm00001d028750基因在调控籽粒性状中的应用,涉及生物工程技术领域,所述Zm00001d028750基因的编码区核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述Zm00001d028750基因编码蛋白的氨基酸序列如SE...
一种调控凯氏带形成的棉花GhMYB36b启动子及其在镉胁迫耐受中的应用
本发明公开了一种调控凯氏带形成的棉花GhMYB36bGhMYB36b启动子及其在镉胁迫耐受中的应用。本发明GhMYB36bGhMYB36b启动子特异性强、调控效率高、来源安全且适配性好。该GhMYB36b启动子仅在镉胁迫条件下显著激活下游基...
SlbZIP1基因在提高植物耐盐碱性中的应用
本发明公开了SlbZIP1SlbZIP1基因在提高植物耐盐碱性中的应用,属于农业生物基因工程技术领域,SlbZIP1SlbZIP1基因在提高植物耐盐碱性中的应用,所述SlbZIP1SlbZIP1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。...
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