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提高基因敲入效率的载体及验证基因精准敲入效率的方法
本发明涉及提高基因敲入效率的载体及验证基因精准敲入效率的方法,该载体包括基因敲除载体、辅助敲入载体和供体模板载体;基因敲除载体包括sgRNA和敲除载体骨架,sgRNA包含与目的基因互补的序列,骨架包含编码Cas蛋白的序列,具有切割活性;辅助...
内蛋白及其用途
本发明涉及内蛋白及其用途。本发明涉及允许有效基因疗法,特别是大于5Kb的基因的有效基因疗法的构建体、载体、相关宿主细胞和药物组合物。
一种基于腺相关病毒转染的人胎盘类器官基因干预方法
本发明公开了一种基于腺相关病毒转染的人胎盘类器官基因干预方法,属于生物医学技术领域。本发明首先收集早孕期胎盘绒毛细胞并构建原代人胎盘类器官;将其消化为单细胞后,与能够干预目的基因的腺相关病毒混合进行转染;通过筛选AAV‑2, 5, 6, 8...
一种用于转运目的蛋白的囊泡及其制备方法与应用
本发明公开了一种外源基因的递送方法,步骤为:用戊型肝炎病毒的ORF3蛋白基因与外源基因融合表达载体或者共表达载体转染囊泡生成细胞,用差速超速离心法纯化细胞培养上清得到囊泡,用囊泡转染囊泡受体细胞,进而将外源基因产物转入受体细胞当中。本发明还...
一种DRP1工程化线粒体衍生囊泡的制备方法及其在抗细胞衰老中的应用
本发明公开了一种DRP1工程化线粒体衍生囊泡的制备方法及其在抗细胞衰老中的应用。本发明通过先构建过表达DRP1DRP1基因的慢病毒载体,转染细胞,获得稳定过表达DRP1DRP1基因的细胞株;再培养该细胞株,收集培养液进分离提取线粒体衍生囊泡...
一种用于造血干细胞的病毒载体及其应用
本申请提供了一种用于造血干细胞的病毒载体及其应用。本申请的第一方面提出了一种用于造血干细胞的慢病毒载体包装系统,所述慢病毒载体包装系统包括重组表达载体,重组表达载体包括编码促血小板生成素和fms相关受体酪氨酸激酶3配体中的核苷酸序列。本发明...
一种外泌体负载miRNA的电穿孔调控方法
本发明涉及电穿孔领域,为解决电穿孔后的聚集问题并确定最佳电穿孔条件以提高负载效率和分子稳定性,提供了一种外泌体负载miRNA的电穿孔调控方法,S100、获取待测物浓度、脉冲参数以及待测物聚集参数之间的关系;所述聚集参数包括:聚集速度以及聚集...
瓜实蝇Lap3a、Lap3b和Lap3c基因及其应用
本发明公开了瓜实蝇Lap3a、Lap3b和Lap3c基因及其应用。本发明的瓜实蝇的Lap3a、Lap3b和Lap3c基因时空和组织表达谱表明,这三个基因都在雄虫的精巢中特异性高表达,特别是在瓜实蝇成虫精巢组织中的转化区。Lap3a、Lap3...
一种发酵土茯苓提取物的制备方法及应用
本发明属于生物发酵技术领域,具体涉及一种发酵土茯苓提取物的制备方法及应用。本发明涉及发酵土茯苓提取物是利用鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)LR.M8菌种,通过发酵提高土茯苓提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制作用,提高土...
高效缓释氢微生物发酵添加剂、制备方法及应用
本发明提供一种高效缓释氢微生物发酵添加剂、制备方法及应用,属于微生物发酵技术领域,该高效缓释氢微生物发酵添加剂,以重量份计,包括:胶囊1‑10份;包含于所述胶囊内的缓释氢发酵组合物0.001‑6份;所述缓释氢发酵组合物包含可发酵碳水化合物,...
一种以玉米浸泡水为原料制备肌醇、磷酸铵镁并回收氯化铵的工艺方法
本发明涉及玉米浸泡水处理技术领域,尤其涉及一种以玉米浸泡水为原料制备肌醇、磷酸铵镁并回收氯化铵的工艺方法,将玉米浸泡水静置沉降后的上清液通过树脂柱吸附,然后解析后经过浓缩,得到的截留液再经过真空浓缩,收集的浓缩液进行酶解处理、过滤后的酶解液...
一种美洛加巴林中间体的酶法合成方法及相关的醇脱氢酶
本发明公开了一种美洛加巴林中间体的酶法合成方法及相关的醇脱氢酶,以外消旋3‑乙基双环[3.2.0]庚‑3‑烯‑6‑酮为底物,产醇脱氢酶的基因工程菌为酶催化剂,配合产甲酸脱氢酶的基因工程菌、甲酸铵和辅酶,搅拌条件下进行酶催化反应,反应产物经纯...
一种双酶法制备中链脂肪酸甘油酯的方法
本发明属于生物化工技术领域,具体涉及一种双酶法催化制备中链脂肪酸甘油酯的方法。本发明提供的方法首先利用脂肪酶催化椰子油等原料完全水解,采用分子蒸馏降温结晶技术,分离出纯度≥99.5%的中链脂肪酸。随后,以高纯脂肪酸与甘油为底物,采用固定化脂...
一种尼龙56盐或尼龙5T盐的制备方法及其应用
本发明公开一种尼龙56盐或尼龙5T盐的制备方法,包括:成盐纯化:将己二酸或对苯二甲酸与赖氨酸以等摩尔比在水中成盐,析出,得到干基纯度≥99.0wt%的赖氨酸‑己二酸盐或赖氨酸‑对苯二甲酸盐;酶促原位脱羧成盐:在水中,以赖氨酸‑己二酸盐或赖氨...
一种次级代谢产物的制备方法
本发明属于医药技术领域,具体涉及一种次级代谢产物的制备方法。该代谢产物的名称为(2‑(4‑(异戊烯基)氧基)苯基)乙酰基甘氨酸甲酯,是从内生真菌Fusarium oxysporumFusarium oxysporum LZC03的发酵液分离...
一种高纯度赖氨酸的发酵-膜分离耦合生产方法
本发明公开了一种高纯度赖氨酸的发酵‑膜分离耦合生产方法,属于氨基酸的技术领域,所述方法包括以下步骤:发酵:在赖氨酸发酵培养基中,接种谷氨酸棒杆菌种子培养液,在32‑34℃下进行发酵培养28‑30h,在发酵培养17‑19h时,添加N‑(4‑氨...
一种氧化酶催化制备艾多沙班中间体的方法
本发明提供了一种艾多沙班中间体(化合物2)的制备方法,其特征是利用氧化酶将化合物1氧化为化合物2。所述氧化酶为筛选来源于Bacillus pumilus的漆酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,编码所述氧化酶的核苷酸序列如SEQ I...
一种醇脱氢酶催化制备(9S)-6, 7, 8, 9-四氢-9-羟基-5H-环庚烷并[b]吡啶-5-酮的方法
本发明公开了一种醇脱氢酶催化制备(9S)‑6, 7, 8, 9‑四氢‑9‑羟基‑5H‑环庚烷并[b]吡啶‑5‑酮的方法,以环庚烷并[b]吡啶‑5, 9‑二酮为原料,以醇脱氢酶为催化剂,反应生成目标产物。所述的醇脱氢酶来源于Acetobact...
一种链霉菌发酵生产西罗莫司的方法
本发明公开了一种链霉菌发酵生产西罗莫司的方法,该方法将西罗莫司生产菌株进行活化和种子扩大培养,将种子液体积比按8~15% v/v的接种量接种于基础培养基中,控制发酵温度为28~30℃;通风比为0.6~1.4vvm;将溶氧和搅拌转速联动,控制...
一种双酶协同制备琼三糖的方法
本发明公开了一种双酶协同制备琼三糖的方法,属于琼胶寡糖制备领域。本发明采用最适酶解温度条件下,采用双酶协同水解琼脂的方法,实现了琼三糖的特异性高效制备。与酸解法制备奇数琼寡糖的方法相比,本发明反应条件温和、易控制,同时减小了琼脂经高温处理后...
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