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  • 本发明公开了细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶突变体、产黄体酮的重组酿酒酵母及其应用。通过ESM‑2语言模型筛获得细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶突变体,可显著提升催化效率。以此构建重组酿酒酵母,优化关键酶拷贝数,引入电子传递系统及过表达关键...
  • 本发明涉及酶提取与纯化技术领域,尤其涉及一种用于小米的脂氧合酶和过氧化物酶的提取方法。步骤如下:S1:对原料预处理,得到脱脂小米粉;S2:对脱脂小米粉进行低pH一步提取,得到粗酶液;S3:向粗酶液中添加硫酸铵,得到浓缩酶液;S4:对浓缩酶液...
  • 本发明涉及蛋白质工程技术领域,尤其涉及通过构建泰乐菌素还原酶tylAKR的突变体,降低其对底物的亲和力,从而提高泰乐菌素A的产量和纯度的方法。本发明将通过对泰乐菌素还原酶关键活性位点的氨基酸进行定向突变获得Y53F突变体,从而抑制泰乐菌素还...
  • 本发明涉及蛋白质工程技术领域,尤其涉及通过构建泰乐菌素还原酶tylAKR的突变体,降低其对底物的亲和力,从而提高泰乐菌素A的产量和纯度的方法。本发明将通过对泰乐菌素还原酶关键活性位点的氨基酸进行定向突变获得W55A突变体,从而抑制泰乐菌素还...
  • 本发明公开了一种光酶催化反应及其在螺环己二烯酮化合物合成中的应用,属于生物工程技术领域。本发明构建了光酶催化合成手性螺环己二烯酮及其衍生物反应体系,催化剂酮还原突变体相比野生酶的催化活力得到了显著的提升。本发明还构建了光酶催化反应首次合成天...
  • 本发明涉及生物工程、生物催化技术领域,具体涉及两种醇脱氢酶突变体及其应用。本发明公开了一对立体选择性相反的醇脱氢酶突变体CpAR2‑M3(F85A/F192L/E209A)及CcPAR‑M1(V158L),其对应的氨基酸序列分别如SEQ I...
  • 本发明公开了一种可高效降解呕吐毒素的山梨糖脱氢酶突变体,属于农业生物技术领域。该突变体基于野生型SDH,通过理性设计与定向进化策略,其突变体包含F103A、T492E和N427A三个突变位点,其氨基酸序列和核苷酸序列分别为SEQ ID NO...
  • 本发明公开了一种尼日尔梭菌来源的7β‑HSDH酶突变体及其应用,本发明以尼日尔梭菌(Clostridium nigeriens)来源的7β‑HSDH酶作为研究对象,提供了一系列的7β‑HSDH酶的单点突变和组合突变,这些7β‑HSDH酶突变...
  • 本发明公开了一种高产茶香酮的醇脱氢酶突变体及其在一锅法中的应用,所述突变体为A182L或A182L/V214T。所述醇脱氢酶突变体具有对4‑羟基异佛尔酮的高催化活性,突变体A182L/V214T催化制备茶香酮的产率可达97%,是原始酶的3....
  • 一种氨基戊二酸氧化酶高密度发酵生产及固定化酶的制备方法,该方法首先通过构建携带来源于氨基戊二酸氧化酶基因重组质粒的大肠杆菌基因工程菌,然后采用大肠杆菌高密度发酵技术在基因工程菌细胞内大量生产氨基戊二酸氧化酶前体,接着利用蛋白酶对细胞破碎分离...
  • 本公开涉及一种提高5‑烯醇式丙酮莽草酰‑3‑磷酸合酶活性的方法及应用。具体地,涉及一种提高5‑烯醇式丙酮莽草酰‑3‑磷酸合酶活性的方法、一种具有5‑烯醇式丙酮莽草酰‑3‑磷酸合酶活性的蛋白、编码该蛋白的基因、插入有该基因的重组载体、转化有该...
  • 本公开涉及一种突变改造第114位苯丙氨酸残基提高5‑烯醇式丙酮莽草酰‑3‑磷酸合酶活性的方法及应用。具体地,涉及一种提高5‑烯醇式丙酮莽草酰‑3‑磷酸合酶活性的方法、一种具有5‑烯醇式丙酮莽草酰‑3‑磷酸合酶活性的蛋白、编码该蛋白的基因、插...
  • 本公开涉及一种突变改造第358位丝氨酸残基提高5‑烯醇式丙酮莽草酰‑3‑磷酸合酶活性的方法及应用。具体地,涉及一种提高5‑烯醇式丙酮莽草酰‑3‑磷酸合酶活性的方法、一种具有5‑烯醇式丙酮莽草酰‑3‑磷酸合酶活性的蛋白、编码该蛋白的基因、插入...
  • 本发明公开了一种具有抗病‑感病双重功能的GSL5蛋白的纯化方法,属于蛋白质纯化技术,本发明提供了一种具有抗病‑感病双重功能的植物基因—GSL5表达蛋白的纯化方法,该方法包括在GSL5的C端融合两种不同的亲和标签,通过两步温和高效的亲和纯化方...
  • 本发明提供了一种透明质酸合酶突变体及其应用,属于生物技术领域,所述透明质酸合酶突变体,是对氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的透明质酸合酶进行下列至少一种的改造:N端2‑17位氨基酸缺失;N端2‑35位氨基酸缺失;C端312‑327位氨...
  • 本发明涉及生物工程领域,尤其涉及Taq酶的突变体、核酸分子及其应用。本发明提供了一种Taq DNA聚合酶的突变体,在野生型Taq DNA聚合酶的基础上,具有下述的一个或多个氨基酸位点突变:第507位点、第543位点、第551位点、第742位...
  • 本发明属于生物医药和药物制剂领域,涉及一种犬尿氨酸酶‑Fc融合蛋白、其纳米药物制剂、制备方法和应用。犬尿氨酸酶‑Fc融合蛋白由犬尿氨酸酶(KYNase)和人免疫球蛋白G的Fc结构域连接组成。相较于PEG修饰犬尿氨酸酶,犬尿氨酸酶‑Fc融合蛋...
  • 本发明属于酶工程技术领域,公开了一种BhrPETase突变体及其应用。本发明提供的BhrPETase突变体包括IYL‑S27L突变体和IYL‑S29V突变体,其氨基酸序列如SEQ ID No.2或3所示。在70℃下,与野生型BhrPETas...
  • 本发明涉及基因工程和蛋白质改造技术领域,公开了一种用于低温酯交换的脂肪酶突变体及其制备方法和应用,其中,用于低温酯交换的脂肪酶突变体是将天然脂肪酶氨基酸序列的第212位色氨酸突变为甘氨酸、将第251位谷氨酸突变为缬氨酸、将第366位天冬氨酸...
  • 本发明公开一种LbCas12a蛋白突变体及其制备方法和应用,所述LbCas12a蛋白突变体是在野生型LbCas12a蛋白上发生K390A或K945A的突变,所述野生型LbCas12a蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过对...
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