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  • 本发明提供了一种青钱柳叶片VIGS瞬时沉默体系的构建方法:将CpPDSCpPDS基因和pTRV2连接,得载体pTRV2‑CpPDSCpPDS;将载体pTRV2‑CpPDSCpPDS和pTRV1分别转化到农杆菌,再涂布LB固体培养基;将含载体...
  • 本发明提供了一种青钱柳根系VIGS瞬时沉默体系的构建方法:将青钱柳CpMYC2CpMYC2基因和pTRV2连接,得重组载体pTRV2‑CpMYC2CpMYC2;将载体pTRV2‑CpMYC2CpMYC2及pTRV1分别转化到农杆菌,得到含重...
  • 本发明涉及一种提高三七细胞中人参皂苷Rg1含量的方法,属于生物技术领域,本发明包括以下步骤:(a)构建CRISPR/Cas9表达载体;(b)采用农杆菌介导的遗传转化方法,将表达载体导入三七细胞,进行侵染和共培养;(c)对经过共培养的三七细胞...
  • 本发明涉及农业生物技术和植物基因工程领域,具体公开了一种利用葡萄合子胚进行转基因获得耐热葡萄种质的方法,其技术要点为:以开花后约60天的二倍体欧亚种葡萄种子中剥取的合子胚为外植体,包括以下步骤:将耐热基因GP1构建至植物超表达载体并转化根癌...
  • 本发明公开了一种农杆菌介导的香蕉叶片转化方法,属于植物分子生物技术领域。该方法包括:选取新鲜香蕉叶片并消毒;将带有目的基因的质粒转化至农杆菌感受态细胞;挑取阳性农杆菌单克隆转入含抗生素的LB液体培养基中培养;使用侵染悬浮液重悬菌体获得侵染液...
  • 本发明公开了一种从脐带间充质干细胞中制备外泌体的方法及其在化妆品中的应用,属于生物医药技术领域,本发明将皮肤修复功能蛋白基因转染脐带间充质干细胞,使外泌体携带更多对皮肤修复和抗衰老有益的功能蛋白,能有效地促进皮肤细胞的再生和修复,增强皮肤弹...
  • 本发明涉及基因工程技术领域,特别是涉及一种基于双报告基因的鸡传染性支气管炎病毒系统及其应用。本发明的基于双报告基因的鸡传染性支气管炎病毒系统能够实现对IBV感染和复制的实时监测,提高了检测的灵敏度和特异性,同时简化了实验操作,降低了成本。该...
  • 本发明属于基因编辑与生物技术领域,涉及一种新型基因编辑系统递送平台及其应用。本发明新型基因编辑系统递送平台,包括能够穿透哺乳动物细胞膜的胞外注射系统,所述胞外注射系统具有类噬菌体尾部穿膜结构和容纳目标分子的腔体;所述胞外注射系统包括装载Ca...
  • 本发明提供一种用在体的线虫肠部制作的钙离子信号研究模型及构建方法,涉及生物模型构建技术领域,构建方法步骤如下:线虫培养;构建转基因用探针质粒:化学合成法合成nhx‑2启动子,并且启动子的两端分别连接Hind Ⅲ、BamH I酶切位点;再使用...
  • 本发明提供了一种多能干细胞诱导分化的成人型T细胞、通用型成人CAR‑T细胞的制备方法,属于细胞分化技术领域。本发明干预SP140SP140基因或SP140蛋白能诱导多能干细胞提前造血,获得有T淋系分化潜能的造血前体细胞和成人型T细胞。将诱导...
  • 本发明提供了一种肌酸激酶启动子定点替换华西牛基因启动子的方法,属于动物基因编辑与遗传育种技术领域。一种提高牛肌肉细胞中FTOFTO基因表达的试剂,包括上游位点敲除用crRNA、下游位点敲除用crRNA、Cas12i核酸酶表达载体和FTO同源...
  • 本发明提供了一种用于多基因定点敲入细胞的报告质粒系统和筛选方法。具体地,本发明提供了一套多基因敲入报告质粒系统,包括多个目的基因的sgRNA质粒,多个基因组供体质粒,一个目的基因敲入报告质粒,一个报告质粒供体质粒和Cas9质粒。其中,报告质...
  • 本发明提供一种细胞内mRNA传感器开关的DNA文库筛选方法及应用。该DNA文库筛选方法包括如下步骤:设计一含有兼并碱基的开关序列的DNA文库;制备一环状表达载体文库;制备最小化线性表达载体文库;无缝克隆;RCA滚环扩增;端粒酶酶切;细胞转染...
  • 本申请涉及动物模型技术领域,特别涉及Stard6基因敲除小鼠动物模型的构建与应用,是将Stard6‑flox小鼠与Stra8‑Cre小鼠交配,获得Stard6基因敲除小鼠模型。本申请构建了Stard6基因敲除小鼠模型,发现在雄性生殖细胞中的...
  • 本发明属于动物基因工程技术领域;具体公开一种C1R基因人源化动物细胞及动物模型的构建方法及其应用,所述C1R基因人源化动物细胞的构建方法包括:在非人动物细胞内导入人C1R基因,使得所述人C1R基因在所述非人动物细胞中表达产生人源化的C1R蛋...
  • 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及脑胶质母细胞瘤(GBM)靶向性溶瘤腺病毒载体及其构建方法和应用。本发明利用人5型腺病毒,通过基因改造,将E1的启动子替换为肿瘤特异性启动子,并插入CD47/PDL1双特异性抗体和免疫调节因子作为治疗基因,...
  • 本发明公开了一种小鼠心肌纤维化病理模型诱导剂。本发明发现表达RGS4的重组腺相关病毒原位注射进小鼠心脏后,能够通过上调心肌组织中RGS4基因的表达水平,促进小鼠心肌纤维化的进程,可用于诱导小鼠心肌纤维化模型。本发明为构建小鼠心肌纤维化病理模...
  • 本发明公开了一种1型鹅星状病毒病毒样颗粒及其制备方法、药物组合物,制备方法包括:将编码1型鹅星状病毒ORF2蛋白的基因片段克隆至杆状病毒转移载体上,构建获得重组质粒;将重组质粒转化至DH10Bac感受态细胞,获得重组杆状病毒杆粒;将重组杆状...
  • 本发明属于分子生物学技术领域,具体涉及病毒粒子的制备方法及其应用。本发明利用反向遗传技术,构建了一种用于可视化追踪病毒感染动态的裂谷热复制缺陷型病毒样粒子。该病毒粒子仅在表达NSm‑Gn‑Gc细胞中扩增传代,在其他细胞中仅发生一轮感染,无法...
  • 本发明提供一种提高餐厨垃圾厌氧发酵产己酸的方法,属于固体废弃物处理与资源化领域,所述方法包括将餐厨垃圾颗粒、驯化后的厌氧污泥混合,得到混合底物,加水使得混合底物的总固体浓度为90 g/L;将甲烷抑制剂、废酒糟和零价铁加入所述混合底物中,进行...
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