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  • 本发明公开了一种浮苔的稳定遗传转化方法,所述遗传转化方法包括以下步骤:(1)浮苔叶状体组织粉碎、(2)外植体预培养、(3)侵染及共培养、(4)第一次筛选培养、(5)第二次筛选培养、(6)扩大培养、(7)转化验证。所述遗传转化方法以浮苔的叶状...
  • 本发明提供了一种利用花药培养与超低温保存技术对转基因水稻T0代进行遗传转化的方法,属于花药离体培养和作物遗传育种技术领域。本发明所述的方法包括转基因水稻T0代植株花药愈伤诱导、花药愈伤的继代和超低温保存、超低温保存愈伤的解冻恢复培养、花药愈...
  • 本发明公开了一种农杆菌介导的红豆草的高效遗传转化方法,属于植物遗传转化技术领域。本发明方法包括以下步骤:(1)红豆草无菌苗的制备、(2)外植体制备、(3)诱导培养、(4)预培养、(5)侵染与共培养、(6)恢复培养、(7)再生培养、(8)生根...
  • 本发明涉及水稻基因工程领域,公开了GSE3.1蛋白及其编码基因在调控水稻种子粒长、粒宽、粒重中的应用。本发明基于CRISPR/Cas9技术对GSE3.1基因进行编辑,利用农杆菌介导法导入粳稻品种中花11 (ZH11),筛选获得敲除突变体。本...
  • 本发明提供了一种Nphs1启动子特异驱动表达的CRE酶动物模型的构建方法及应用。利用CRISPR‑Cas9系统将donor质粒中Nphs1启动子序列、CRE 酶基因编码序列及PolyA序列插入到小鼠基因组H11位点中,从而实现小鼠足细胞特异...
  • 本发明提供了一种CAG启动子特异驱动LSL‑RCAN1‑P2A‑EGFP‑Flag tag表达动物模型的构建方法及应用。通过将CAG启动子序列、LSL序列、RCAN1基因编码序列、EGFP序列、Flag tag序列及PolyA序列插入到小鼠...
  • 本发明属于鱼类育种技术领域,公开了一种提高鱼类抗逆性的方法。本发明利用Tol2转座子系统将pmpcbpmpcb基因转入斑马鱼中,提高Pmpcb蛋白的表达水平,获得稳定遗传的Tg(gfapgfap:pmpcbpmpcb)转基因斑马鱼;在正常养...
  • 本申请公开了一种Fos基因的过表达载体、过表达Fos的CHO细胞系及其构建方法,涉及基因工程技术领域,包括由Fos构建的PB513B‑Fos‑Myc‑T2A‑Puro质粒载体和能够过表达Fos制备的CHO‑Fos细胞系;所述过表达载体包含密...
  • 本发明公开了一种以线性化PEI为转染试剂的以线性化PEI为转染试剂的高产CHO‑K1瞬时转染方法。通过置换培养基、零孵育复合物、特定DNA比例及温度调控,在10天内使抗体滴度达到约1 g/L,显著降低表达载体用量并缩短研发周期,适用于抗体药...
  • 本申请涉及神经科学钙成像技术领域,涉及一种全脑神经细胞核表达NEMOs钙离子指示剂斑马鱼品系及构建方法。该方法将NEMOs质粒、LSSmCrimson质粒和Tol2 mRNA显微注射到斑马鱼鱼卵中,培养后通过红色荧光观察和刺激下的绿色荧光观...
  • 本发明涉及提高基因敲入效率的载体及验证基因精准敲入效率的方法,该载体包括基因敲除载体、辅助敲入载体和供体模板载体;基因敲除载体包括sgRNA和敲除载体骨架,sgRNA包含与目的基因互补的序列,骨架包含编码Cas蛋白的序列,具有切割活性;辅助...
  • 本发明涉及内蛋白及其用途。本发明涉及允许有效基因疗法,特别是大于5Kb的基因的有效基因疗法的构建体、载体、相关宿主细胞和药物组合物。
  • 本发明公开了一种基于腺相关病毒转染的人胎盘类器官基因干预方法,属于生物医学技术领域。本发明首先收集早孕期胎盘绒毛细胞并构建原代人胎盘类器官;将其消化为单细胞后,与能够干预目的基因的腺相关病毒混合进行转染;通过筛选AAV‑2, 5, 6, 8...
  • 本发明公开了一种外源基因的递送方法,步骤为:用戊型肝炎病毒的ORF3蛋白基因与外源基因融合表达载体或者共表达载体转染囊泡生成细胞,用差速超速离心法纯化细胞培养上清得到囊泡,用囊泡转染囊泡受体细胞,进而将外源基因产物转入受体细胞当中。本发明还...
  • 本发明公开了一种DRP1工程化线粒体衍生囊泡的制备方法及其在抗细胞衰老中的应用。本发明通过先构建过表达DRP1DRP1基因的慢病毒载体,转染细胞,获得稳定过表达DRP1DRP1基因的细胞株;再培养该细胞株,收集培养液进分离提取线粒体衍生囊泡...
  • 本申请提供了一种用于造血干细胞的病毒载体及其应用。本申请的第一方面提出了一种用于造血干细胞的慢病毒载体包装系统,所述慢病毒载体包装系统包括重组表达载体,重组表达载体包括编码促血小板生成素和fms相关受体酪氨酸激酶3配体中的核苷酸序列。本发明...
  • 本发明涉及电穿孔领域,为解决电穿孔后的聚集问题并确定最佳电穿孔条件以提高负载效率和分子稳定性,提供了一种外泌体负载miRNA的电穿孔调控方法,S100、获取待测物浓度、脉冲参数以及待测物聚集参数之间的关系;所述聚集参数包括:聚集速度以及聚集...
  • 本发明公开了瓜实蝇Lap3a、Lap3b和Lap3c基因及其应用。本发明的瓜实蝇的Lap3a、Lap3b和Lap3c基因时空和组织表达谱表明,这三个基因都在雄虫的精巢中特异性高表达,特别是在瓜实蝇成虫精巢组织中的转化区。Lap3a、Lap3...
  • 本发明属于生物发酵技术领域,具体涉及一种发酵土茯苓提取物的制备方法及应用。本发明涉及发酵土茯苓提取物是利用鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)LR.M8菌种,通过发酵提高土茯苓提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制作用,提高土...
  • 本发明提供一种高效缓释氢微生物发酵添加剂、制备方法及应用,属于微生物发酵技术领域,该高效缓释氢微生物发酵添加剂,以重量份计,包括:胶囊1‑10份;包含于所述胶囊内的缓释氢发酵组合物0.001‑6份;所述缓释氢发酵组合物包含可发酵碳水化合物,...
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