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  • 本申请公开了一种线性RNA前体、环状RNA及其制备方法和应用。本申请的线性RNA前体从5’端至3’端包括5’外侧同源臂、3’内含子、3’外显子、5’内侧同源臂、5’间隔子、IRES序列、插入外源序列GOI、3’间隔子、3’内侧同源臂、5’外...
  • 本发明涉及一种用于富含次生代谢物植物的基因组DNA的提取方法及缓冲液,属于分子生物学及植物学技术领域。解决传统DNA提取方法在处理富含生物碱、多酚等次生代谢物的植物组织时存在的DNA提取效率低、纯度差、易降解等技术问题。包括:在液氮环境下研...
  • 本发明公开了一种花生叶片高质量基因组DNA提取方法,属于生物遗传信息提取技术领域。所述花生叶片高质量基因组DNA提取方法,包括如下步骤:将花生叶片快速冷冻,然后进行研磨;加入预处理液,进行预处理;离心后,弃上清,加入CTAB提取液,孵育;待...
  • 本发明公开了一种间充质干细胞来源的PDRN及其制备方法,具体涉及生物技术领域,该方法具体步骤包括:收集间充质干细胞,加入Triton X‑100、十二烷基硫酸钠、蛋白酶、核酸酶和盐酸胍,得到裂解液;向裂解液中加入十二烷基硫酸钠和氯化钠进行盐...
  • 本发明属于生物技术领域,具体涉及抗AEP特异性纳米抗体噬菌体的筛选方法,包括如下步骤:S1,以AEP抗原组合物对目标动物进行免疫,获得cDNA;S2,从cDNA中扩增AEP的VHH的核苷酸片段;S3,制备单一类型酶切位点‑VHH基因;S4,...
  • 本发明公开了一种大片段DNA合成组装的方法,涉及生物技术领域,包括以下步骤:S01、序列拆分:将目标大片段DNA拆分为N个长度为3000–5000bp的小片段DNA,相邻片段间设计25–40bp重叠区域,首尾片段分别引入与线性化载体同源的3...
  • 本发明涉及一种超螺旋质粒DNA纯化方法,其包括以下步骤:(1)将含有目的质粒的菌体裂解液经微滤处理得到滤液;(2)利用切向流过滤系统将滤液经中空纤维柱浓缩得到浓缩液;(3)利用切向流过滤系统将浓缩液经中空纤维柱换液,所采用的置换液为含有8~...
  • 本发明涉及一种羊肚菌单孢杂交选育方法,属于菌种选育技术领域,本发明包括以下步骤:(1)选取羊肚菌,通过组织分离法获得组织分离菌株,同时通过单孢分离法获得单孢分离菌株;(2)分别对组织分离菌株和单孢分离菌株的基因组进行交配型基因检测;(3)同...
  • 本发明属于生物化工、基因技术领域,公开了一种提高裂殖壶菌胡萝卜素产量的高产突变株的制备方法和应用,包括如下步骤:对裂殖壶菌HX‑308对数期菌悬液进行ARTP诱变,诱变时间为60s,将诱变后的菌体用1M山梨醇洗下,得到ARTP诱变菌悬液;将...
  • 本发明属于酶工程技术领域,特别涉及一种固定化乙醇脱氢酶及其制备方法和应用。所述的固定化乙醇脱氢酶,是以磁性金属有机骨架材料Fe3O4@MIL‑101(Fe)为载体,通过共价交联及吸附乙醇脱氢酶制得的固定化乙醇脱氢酶。本发明制备的固定化乙醇脱...
  • 本发明提供了一种黄芪药渣生物炭负载微生物菌剂及其制备方法和应用,制备时先培养桑树肠杆菌Enterobacter mori XJ 10菌剂,再经黄芪药渣高温热解、工业红糖改性得改性生物炭,二者按比例混合振荡吸附、真空干燥制得生物炭负载功能菌剂...
  • 本发明公开了一种固定酿酒酵母的生物胶囊及其制备方法和应用,属于发酵工程领域。本发明将酿酒酵母CECA与链格孢属MG1共接种于生物胶囊固定化培养基,培养,制成了固定酿酒酵母的生物胶囊。基于参数优化,本发明建立了兼具高细胞活性和操作稳定性的生物...
  • 本发明公开了一种D‑阿洛酮糖6‑磷酸‑3‑差向异构酶突变体及其在制备阿洛酮糖中的应用,属于酶工程技术领域。本发明对D‑阿洛酮糖6‑磷酸‑3‑差向异构酶A6PE的氨基酸序列进行定点突变,构建获得了热稳定性和催化活性均显著提升的组合突变体T12...
  • 本发明涉及重组抗体表达的技术领域,具体涉及一种提高IgM重组表达效率的分子伴侣PDI及其应用,所述分子伴侣PDI包含如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列。本发明的分子伴侣共表达能显著提升IgM的表达稳定性,同时重组表达IgM抗体与杂交瘤...
  • 本发明涉及抗体工程技术领域,具体涉及本发明涉及抗体工程技术领域,具体涉及一种提高酵母表面Fab有效展示效率的分子伴侣PDI及其应用,所述分子伴侣PDI包含如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。本发明的分子伴侣与Fab共表达能显著提升Fa...
  • 本发明公开了一种高效赖氨酸脱羧酶突变体及其在合成戊二胺中的应用。通过针对克雷伯氏菌(Klebsiella grimontii)来源的野生型赖氨酸脱羧酶(SEQ ID NO.2)进行多位点突变,获得包括单突变体(如N218G、T222V、C2...
  • 本发明公开了一株异源表达果胶裂解酶工程菌、利用其制备果胶裂解酶的方法与应用,异源表达果胶裂解酶为密码子优化后的重组蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示;编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明构建了含上述编码基因的...
  • 本发明公开了一种核壳型生物反应器及其制备方法与应用,所述反应器由中心向外顺序包括核层、中层和外层,所述核层为铜锌纳米酶,所述中层为碳酸酐酶,所述外层为星型三嵌段聚合物PPA。本发明核壳生物反应器在保留天然酶生物材料高效性、环境友好性等特性的...
  • 本发明公开了聚谷氨酸降解酶及其在可控制备不同分子量γ‑PGA中的应用。本发明提供了一种发酵大豆芽孢杆菌(Bacillus glycinifermentans)来源的降解酶,通过促溶NT11标签和去信号肽PGAase序列的降解酶融合得到聚谷氨...
  • 本发明属于酶工程技术领域,公开了一种通过易错PCR技术和饱和突变技术获得的碱性蛋白酶突变体及其应用。所述碱性蛋白酶突变体是利用易错PCR技术对贝莱斯芽胞杆菌来源的碱性蛋白酶基因hapR进行随机突变和饱和突变筛选获得,HapR蛋白第303位亮...
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