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  • 本申请涉及合成生物学、代谢工程和发酵工程领域,公开了一种基因工程菌及其在生产α‑酮戊二酸中的应用,包括:构建以大肠杆菌BW25113或谷氨酸棒杆菌ATCC13032为宿主的基因工程菌株,通过染色体整合过表达型异柠檬酸脱氢酶基因、敲除α‑酮戊...
  • 本发明涉及生物法合成天然染料技术领域,尤其涉及一种无抗生素需求型观蓝高产菌株及其构建与应用。本发明以谷氨酸棒杆菌为起始菌株,通过对三羧酸循环基因进行调控干涉,以及调整外源蓝色素合成酶BpsA在基因组中的拷贝数,获得一种观蓝高产菌株。该菌株在...
  • 本发明提供了一种产L‑蛋氨酸工程菌株及其构建方法和应用。所述产L‑蛋氨酸工程菌株通过强化蛋氨酸合成途径的代谢通量,阻断竞争途径将糖代谢通量重定向至L‑蛋氨酸产生等策略,构建可高产L‑蛋氨酸工程菌株的重组大肠杆菌作为底盘菌;进一步,通过增强L...
  • 本发明公开了一种乳酸代谢调控工程菌及其构建方法与应用,该乳酸代谢调控工程菌包括底盘菌和重组质粒;所述底盘菌细胞为EcNΔnlpI,EcNΔnlpI为删除nlpI基因的EcN菌株,用于增强外膜囊泡的释放;所述重组质粒用于使工程菌表达肿瘤靶向分...
  • 本发明涉及了一种产两性霉素B的形态优化重组结节链霉菌、构建方法及其应用,通过过表达半乳糖氧化酶蛋白基因GlxA基因改变结节链霉菌细胞形态从而达到提升两性霉素B产量,降低发酵液粘度,改变菌株生长状态最终实现生产过程节能、降耗的目的。本发明从结...
  • 本发明公开了一种用于生产靛蓝及其衍生物的自养生物催化剂及其应用,涉及生物工程领域。本发明自养生物催化剂为聚球藻工程菌,所述聚球藻工程菌通过以下方式构建获得:将外源基因串联克隆至质粒中,并通过同源重组将质粒上的外源基因片段导入聚球藻基因组,筛...
  • 本发明涉及一种合成唾液酸乳糖‑N‑四糖c的重组大肠杆菌及其构建方法和应用,通过添加新的合成途径,优化其前体CMP‑Neu5Ac的供应;通过筛选高效、特异性强的α2, 6‑唾液酸转移酶,并将其整合到大肠杆菌BL21(DE3)基因组中,进一步提...
  • 本发明提供了一种高效制备高纯度唾液酸乳糖‑N‑四糖a的重组大肠杆菌的构建方法及应用。本发明通过在大肠杆菌BL21(DE3)基因组中精准整合编码β‑1, 3‑N‑乙酰葡萄糖胺基转移酶、β‑1, 3‑半乳糖基转移酶和α‑2, 3‑唾液酸糖基转移...
  • 本发明为一种外泌体提取纯化的组合及其制备方法,主要包含以下物质:聚乙二醇PEG与葡聚糖,将聚乙二醇PEG与葡聚糖在水溶液中形成不相容的双水相系统,外泌体选择性分配至含聚乙二醇PEG的上相,杂质溶于含葡聚糖的下相,从而实现外泌体的高回收率和高...
  • 本发明属于纳米生物技术领域,具体公开了沙棘来源细胞外囊泡及其制备方法和应用,制备方法如下:取沙棘原浆进行离心,去除上层油相;吸取的中层水相离心,去除上层油相;吸取中层水相离心;弃去上层油相,弃去中层水相,并使用缓冲液充分重悬沉淀并离心,保留...
  • 本发明属于植物组织工程技术领域,具体涉及一种从植物培养物及植物培养基中获得植物细胞外囊泡的方法及应用。本发明提供的从植物培养物及培养基中提取细胞外囊泡的方法,主要包括愈伤组织诱导、继代培养、悬浮培养、预处理、粗提及纯化等步骤。核心优势在于:...
  • 本发明属于生物技术与水产养殖领域,尤其涉及一种基于瓦氏黄颡鱼低氧诱导肝脏细胞外囊泡提高其耐低氧能力的方法,采用差速离心与高精度碘克沙醇密度梯度离心相结合的方法提取经过低氧处理的瓦氏黄颡鱼肝脏组织中的高纯度细胞外囊泡EVs;使用PBS将提取的...
  • 本申请公开一种大规模冷冻保存动物细胞的方法:将待保存细胞在基质胶的支持下进行第一阶段扩增;将完成第一阶段扩增的待保存细胞在微载体的支持下进行第二阶段扩增;将所述待保存细胞与无血清冻存液混合后制成微囊悬液;将所述微囊悬液置于冻存容器中实施冷冻...
  • 本申请涉及细胞生物学技术领域,具体公开了一种原代睑板腺上皮细胞的分离培养方法及其得到的原代睑板腺上皮细胞与应用。所述方法包括:采用特定配比的Ⅰ型胶原酶、分散酶和胰蛋白酶组成的复合消化液对睑板腺组织进行高效温和消化;用含血清中和液中止消化并收...
  • 雄烯二酮调控MSMO1表达在猪卵巢颗粒细胞中的应用,所述的应用具体是在调控猪卵巢颗粒细胞的增殖、凋亡和/或E22、Pg分泌中的应用。本发明筛选出了40nM雄烯二酮为猪卵巢颗粒细胞最适宜的生长浓度;添加40nM雄烯二酮对猪卵巢颗粒细胞增殖和E...
  • 本发明涉及呼吸系统疾病体外模型技术领域,尤其是涉及一种慢性阻塞性肺疾病体外模型的构建方法与应用。本发明涉及一种培养基添加剂组合物,其包括脂多糖(LPS)、香烟烟气提取物(CSE)以及猪胰弹性蛋白酶(PPE),以及来源于哺乳动物肺组织的精准肺...
  • 本发明提供一种黄唇鱼鳃丝细胞系的建立方法及其应用,所述的细胞系的保藏编号为CGMCC No.46720。本发明建立的黄唇鱼鳃丝细胞系具备良好的遗传稳定性,已实现100代以上连续传代。基因转染实验验证了该细胞系对外源基因的高效转入与表达能力,...
  • 本发明属于生物医学工程技术领域,具体涉及一种基于乳液分离的外泌体提取方法,包括如下步骤:将含有外泌体的生物样本、有机试剂、表面活性剂混合后进行高速机械混合得到乳液,恒温搅拌一段时间后施加电场处理,处理后的乳液离心保留水相,对水相中的外泌体进...
  • 本发明涉及细胞培养技术领域,具体公开了用于观察成牙本质细胞极性的体外分层培养模型构建方法,所述方法包括提取下颌切牙颈环组织,分离牙源性上皮组织与牙乳头组织;将牙源性上皮组织与牙乳头组织分别消化为单细胞悬液;将上皮细胞接种于可移动的聚己内酯膜...
  • 本申请涉及一种在无饲养层且无异源的条件下衍生人胚胎干细胞 (hESC) 系的方法。
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