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龙图腾网获悉清华大学申请的专利一种无细胞体系拓扑蛋白以及其结构单体的合成方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115109815B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-05-12发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210446886.7，技术领域涉及：C12N15/70；该发明授权一种无细胞体系拓扑蛋白以及其结构单体的合成方法是由卢元;王婷设计研发完成，并于2022-04-26向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种无细胞体系拓扑蛋白以及其结构单体的合成方法在说明书摘要公布了：本申请公开了一种无细胞体系拓扑蛋白结构单体的合成方法，包括如下步骤：合成包含表达目标蛋白的基因序列、表达SpyTag的基因序列或表达SpyCatcher的基因序列的基本序列；将所述基本序列加入到无细胞体系中以合成包括目标蛋白的结构单体。本申请还提供一种无细胞体系拓扑蛋白的合成方法。本申请的目的在于提供一种比细胞系统更简单、更快的蛋白质合成方法，在开放环境中具有前所未有的设计自由度，所合成的蛋白质的聚合度以及长度可控。

本发明授权一种无细胞体系拓扑蛋白以及其结构单体的合成方法在权利要求书中公布了：1.一种无细胞体系拓扑蛋白的合成方法，其特征在于，包括如下步骤： 合成包含表达目标蛋白的基因序列和表达SpyTag的基因序列的第一基本序列； 合成包含表达目标蛋白的基因序列和表达SpyCatcher的基因序列的第二基本序列； 将所述第一基本序列和第二基本序列加入到无细胞体系中，以合成包括SpyTag和目标蛋白的第一结构单体，以及包括SpyCatcher和目标蛋白的第二结构单体； 所述第一结构单体和第二结构单体进一步聚合成具有拓扑结构的目标蛋白； 当合成二聚体时，所述第一基本序列与第二基本序列的组合选自I+H、I+B、J+H、J+G、J+B、I+G、I+A、L+A以及K+C中的一种； 当合成三聚体时，所述第一基本序列与第二基本序列的组合选自F+B、F+G、K+I、F+H以及E+J中的一种； 当合成二聚体以及三聚体的混合物时，所述第一基本序列与第二基本序列的组合选自E+J、E+I、K+J、L+B、L+H、K+C以及L+G中的一种； 当合成二聚体、三聚体以及多聚体的混合物时，所述第一基本序列与第二基本序列的组合为E+L或K+L； 其中SpyTag简称ST，SpyCatcher简称SC，His-Tag简称His，目标蛋白基因序列简称PS；His-GFP-SC简称A，GFP-SC-His简称G，His-SC-GFP简称B，SC-GFP-His简称H，His-GFP-ST简称C，GFP-ST-His简称I，His-ST-GFP简称D，ST-GFP-His简称J，His-SC-GFP-SC简称E，SC-GFP-SC-His简称K，His-ST-GFP-ST简称F，ST-GFP-ST-His简称L， 所述ST的核苷酸序列为SEQIDNO:1，所述SC的核苷酸序列为SEQIDNO:2。

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