广东省职业病防治院(广东省职业卫生检测中心);华南师范大学秦亦如获国家专利权
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龙图腾网获悉广东省职业病防治院(广东省职业卫生检测中心);华南师范大学申请的专利一种荧光共振能量转移探针体系及高灵敏均相免疫检测全血中米酵菌酸的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120847407B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-05-05发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202511046172.7,技术领域涉及:G01N33/577;该发明授权一种荧光共振能量转移探针体系及高灵敏均相免疫检测全血中米酵菌酸的方法是由秦亦如;魏嵬;陈宇;吴邦华;戎伟丰设计研发完成,并于2025-07-29向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种荧光共振能量转移探针体系及高灵敏均相免疫检测全血中米酵菌酸的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种荧光共振能量转移探针体系及高灵敏均相免疫检测全血中米酵菌酸的方法。本发明以表面标记BA单克隆抗体的NaYbF4:Tm纳米晶作为供体探针,表面标记BA抗原的NaDyF4纳米晶作为受体探针,构建荧光共振能量转移探针体系;将该探针体系用于全血中米酵菌酸的定性和定量检测,先将供体探针与待测全血样品孵育并测试800nm处发射的荧光强度,再加入受体探针共同孵育并测试800nm处发射的荧光强度,两次荧光强度比值与对照组或标准曲线进行比对即可定性或定量检测出全血中的米酵菌酸。本发明探针体系能有效克服全血样本的背景干扰,实现对全血中BA的高灵敏均相免疫检测。
本发明授权一种荧光共振能量转移探针体系及高灵敏均相免疫检测全血中米酵菌酸的方法在权利要求书中公布了:1.一种非诊断目的的均相免疫检测全血中米酵菌酸的方法,其特征在于, 定性法,包括以下步骤: 1建立阴性对照组:向荧光共振能量转移探针体系的供体探针缓冲液中加入不含BA的全血样品,进行第一次孵育后,在980nm光激发下,测试800nm处发射的荧光强度I0;再加入受体探针缓冲液,进行第二次孵育后,在980nm光激发下,测试800nm处发射的荧光强度I; 2检测组:向荧光共振能量转移探针体系的供体探针缓冲液中加入待测全血样品,进行第一次孵育后,在980nm光激发下,测试800nm处发射的荧光强度I0;再加入受体探针缓冲液,进行第二次孵育后,并在980nm光激发下,测试800nm处发射的荧光强度I; 若检测组中荧光强度比值II0等于阴性对照组中荧光强度比值II0,则待测全血样本不含BA;若检测组中荧光强度比值II0大于阴性对照组中荧光强度比值II0,则待测全血样本含BA; 定量法,包括以下步骤: 1建立标准曲线和拟合方程:向荧光共振能量转移探针体系的供体探针缓冲液中分别加入一系列浓度梯度的BA标准全血样品,进行第一次孵育后,在980nm光激发下,测试800nm处发射的荧光强度I0;再分别加入受体探针缓冲液,进行第二次孵育后,在980nm光激发下,测试800nm处发射的荧光强度I,以BA标准全血样品的浓度作为横坐标,荧光强度比值II0作为纵坐标,建立标准曲线并拟合出方程式; 2检测:向荧光共振能量转移探针体系的供体探针缓冲液中加入待测全血样品,进行第一次孵育后,在980nm光激发下,测试800nm处发射的荧光强度I0;再加入受体探针缓冲液,进行第二次孵育后,并在980nm光激发下,测试800nm处发射的荧光强度I,将荧光强度比值II0代入步骤1的标准曲线和或方程式算出标准曲线中BA的含量; 所述荧光共振能量转移探针体系由供体探针和受体探针构成,其中供体探针为表面标记BA单克隆抗体的NaYbF4:Tm纳米晶,受体探针为表面标记BA抗原的NaDyF4纳米晶; 所述表面标记BA单克隆抗体的NaYbF4:Tm纳米晶的晶型为六方相,粒径为20-30nm; 所述表面标记BA抗原的NaDyF4纳米晶的晶型为立方相;粒径为5-8nm。
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