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龙图腾网获悉北京化工大学申请的专利一种多聚体氟化酶的协同工程化改造方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN121281634B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-10发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202511860716.3，技术领域涉及：G16B20/30；该发明授权一种多聚体氟化酶的协同工程化改造方法是由方云明;张一博;王萌;陈必强设计研发完成，并于2025-12-11向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种多聚体氟化酶的协同工程化改造方法在说明书摘要公布了：本申请涉及生物工程技术领域，尤其是涉及一种多聚体氟化酶的协同工程化改造方法，其包括对目标酶的N端序列、远端区域和核心区进行分步协同修饰。通过祖先序列重建或疏水性分析优化N端序列，利用多重序列比对与自由能计算筛选远端突变位点，并结合保守性分析与饱和突变提升核心区催化活性，最终构建多位点组合突变体。本申请能够显著提高多聚体氟化酶的整体结构稳定性与局部催化效率，同时增强热稳定性，为其他高度保守的多聚体酶改造提供了普适性方法论，具有广泛的应用前景。

本发明授权一种多聚体氟化酶的协同工程化改造方法在权利要求书中公布了：1.一种用于多聚体氟化酶协同工程化改造的方法，其特征在于，所述多聚体氟化酶为野生型MA37氟化酶；所述方法包括以下步骤： S10：针对MA37的N端序列，收集至少25个同源氟化酶序列进行多序列比对，采用祖先序列重建技术推断可能的祖先N端序列后，分析候选N端序列的疏水性，选择疏水性显著高于野生型MA37N端的序列；通过分子克隆技术将选定的优化N端序列替换MA37的原始N端，构建N端修饰文库，并通过活性测定筛选最优N端变体； S20：针对远离MA37活性中心的远端区域，对25个同源氟化酶序列进行全局多重序列比对，排除活性中心残基及保守性高于75%的结构核心残基，筛选出序列多样性在50%到70%的位点作为候选远端位点；利用GROMACS软件进行分子建模和分子动力学模拟，对候选位点进行虚拟饱和突变，并利用FoldX软件计算每个突变体的自由能变化，选择自由能变化为显著负值的突变进行实验验证； S30：针对MA37活性中心周围的保守核心区，以底物SAM的C5原子为球心、5Å为半径定义核心区范围，对该范围内所有残基进行氨基酸保守性分析；对保守性较低的残基进行饱和突变，构建突变文库；结合粗酶活性筛选和纯酶精确活性测定，并辅以FoldX工具计算自由能变化，选择显著降低自由能且活性提升的突变； S40：将步骤S10筛选到的最优N端序列、步骤S20验证有效的远端突变和步骤S30鉴定的核心区突变进行组合，通过分子生物学方法构建组合突变体质粒；将质粒转化至表达宿主，诱导表达并纯化获得组合突变体蛋白。

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