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龙图腾网获悉中国中医科学院中药研究所;四川仟源中药饮片有限公司申请的专利一种区分水蛭和蚂蟥及其近缘混伪品的HPLC方法及其应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119985790B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-10发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510273468.6，技术领域涉及：G01N30/02；该发明授权一种区分水蛭和蚂蟥及其近缘混伪品的HPLC方法及其应用是由高慧敏;王文端;马悦;刘煜飞;王智民;陈两绵;陈劲松;靳李娜设计研发完成，并于2025-03-10向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种区分水蛭和蚂蟥及其近缘混伪品的HPLC方法及其应用在说明书摘要公布了：本发明公开了一种水蛭药材及其近缘混伪品的特征图谱构建方法。该构建方法包括如下步骤：通过高效液相色谱法建立水蛭药材及其近缘混伪品的特征图谱，包括分别从水蛭药材与其近缘混伪品提取并制得供试品溶液；制备对照品溶液，将供试品溶液和对照品溶液分别进行高效液相色谱法检测，即得对应的特征图谱，可以快速地区别出水蛭药材及其近缘混伪品。所述水蛭对照药材选自水蛭科水蛭或蚂蟥；所述水蛭药材近缘混伪品选自菲牛蛭、棒纹牛蛭或日本类蛭。该方法简单方便，具有操作简单、分离度好、精密度高、重复性好以及稳定性好等优点，能够实现利用HPLC快速、准确区分水蛭和蚂蟥及其近缘混伪品。

本发明授权一种区分水蛭和蚂蟥及其近缘混伪品的HPLC方法及其应用在权利要求书中公布了：1.一种水蛭科水蛭HirudonipponicaWhitman药材、蚂蟥WhitmaniapigraWhitman药材及医蛭科菲牛蛭、棒纹牛蛭和沙蛭科日本类蛭的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括如下步骤： 水蛭科水蛭HirudonipponicaWhitman或蚂蟥WhitmaniapigraWhitman对照药材溶液的制备：称取适量的水蛭科水蛭HirudonipponicaWhitman或蚂蟥WhitmaniapigraWhitman药材粉末过筛，置于容器中，加入47.5%~52.5%甲醇，称定重量，超声提取一段时间后放冷，再次称定重量，使用溶剂补充损失的重量，摇匀，离心，取上清液，得到所述水蛭科水蛭HirudonipponicaWhitman或蚂蟥WhitmaniapigraWhitman对照药材溶液；其中，所述水蛭科水蛭HirudonipponicaWhitman或蚂蟥WhitmaniapigraWhitman药材与所述47.5%~52.5%甲醇之间的质量体积之比值为0.0475~0.0525，单位为gml； 医蛭科菲牛蛭、棒纹牛蛭或沙蛭科日本类蛭对照药材溶液的制备：称取适量的医蛭科菲牛蛭、棒纹牛蛭或沙蛭科日本类蛭对照药材粉末0.5g过筛，置于容器中，加入50%甲醇10mL，称定重量，超声提取一段时间后放冷，再次称定重量，使用溶剂补充损失的重量，摇匀，离心，取上清液，得到所述医蛭科菲牛蛭、棒纹牛蛭或沙蛭科日本类蛭对照药材溶液；对照品溶液的制备：称取适量的水蛭胺A、水蛭胺B、水蛭胺C、SZ-1和肌苷对照品，添加50%甲醇配制成水蛭胺A、水蛭胺B、水蛭胺C、SZ-1和肌苷浓度各为1~100μgmL的所述对照品溶液； 根据高效液相检测所述对照药材溶液和所述对照品溶液的结果，获得水蛭科水蛭HirudonipponicaWhitman、蚂蟥WhitmaniapigraWhitman对照药材及医蛭科菲牛蛭、棒纹牛蛭和沙蛭科日本类蛭对照药材标准特征图谱； 高效液相检测的色谱条件为：采用KromasilC18色谱柱，流动相A为甲醇：乙腈=4：1的混合溶液，流动相B为0.0475%~0.0525%的三氟乙酸水溶液，梯度洗脱程序为：0~5min，5%A→9%A；5~20min，9%A；20~22min，9%→14%A；22~40min，14%A；40~42min，14%A→20%A；42~80min，20%A；流速为0.95~1.05mLmin，柱温为28.5~31.5℃，检测波长245nm，进样量为5~15μL。

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