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江苏大学曾侯诚获国家专利权

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龙图腾网获悉江苏大学申请的专利一种细胞外囊泡实时富集和检测方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119915586B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-10发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510234133.3,技术领域涉及:G01N1/34;该发明授权一种细胞外囊泡实时富集和检测方法是由曾侯诚;吴峰;钱晖;纪成;孙梓暄设计研发完成,并于2025-02-28向国家知识产权局提交的专利申请。

一种细胞外囊泡实时富集和检测方法在说明书摘要公布了:本发明涉及一种细胞外囊泡实时富集和检测方法;属于生物检测技术领域;本发明首先采用垂直蒸发法制备了二氧化硅胶体晶体Silicacolloidalcrystal,SCC薄膜;然后将二硬脂酰磷脂酰乙醇胺‑聚乙二醇‑羧基DSPE修饰在二氧化硅胶体晶体薄膜上,利用DSPE与磷脂双分子层的亲和特性分离富集生物液体中的细胞外囊泡;再通过构建反射干涉光谱系统,利用对分离细胞外囊泡过程中引起的光学厚度变化对细胞外囊泡进行实时检测;本发明不仅能够快速高效率分离多种生物液体中的细胞外囊泡,还能够对分离的细胞外囊泡进行实时浓度和膜蛋白表达量分析;本发明为多种体液的细胞外囊泡分离提供了一种快速低成本的一体化多功能分析方法。

本发明授权一种细胞外囊泡实时富集和检测方法在权利要求书中公布了:1.一种细胞外囊泡实时富集和检测方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤: S1.利用垂直沉积法制备二氧化硅胶体晶体薄膜,即SCC薄膜; S2.制备DSPE修饰的二氧化硅胶体晶体薄膜; 所述DSPE修饰的二氧化硅胶体晶体薄膜的制备方法包括: 将SCC薄膜浸泡在氨丙基三乙氧基硅烷的乙醇溶液中,得到氨基化的SCC薄膜;将DSPE溶于乙醇溶液,得到溶液一,将N-羟基琥珀酰亚胺和1-3-二甲氨基丙基-3-乙基碳二亚胺盐酸盐溶于Tris-HCl缓冲液,得到溶液二,将溶液一和溶液二混合并调节pH值,即得混合溶液;把氨基化的SCC薄膜与混合溶液反应后,用超纯水洗涤,即得到DSPE修饰的二氧化硅胶体晶体薄膜,储存在超纯水中备用; S3.组建OPLIorderedporouslayerinterferometry系统: 以DSPE修饰的二氧化硅胶体晶体薄膜为基底组装成反应池,并与倒置显微镜和光纤光谱仪组成OPLIorderedporouslayerinterferometry系统; S4.细胞外囊泡的分离富集: 向OPLI系统的反应池中通入PBS溶液,稳定基线后,再循环通入待分离细胞外囊泡的样品溶液,待光谱仪显示基线稳定,对选定反射干涉光谱波段进行谱线拟合,采用极值法拟合计算得到二氧化硅胶体晶体薄膜的光学厚度1,即完成细胞外囊泡的分离富集; S5.解离富集的细胞外囊泡: 富集完成后通入洗涤剂,洗去吸附在SCC薄膜上的杂质;最后循环通入洗脱溶液,将SCC薄膜富集的细胞外囊泡进行解离; S6.建立线性关系,分析细胞外囊泡浓度: 循环通入不同稀释比例的待分离细胞外囊泡的样品溶液,重复步骤S4和S5,以光学厚度1为纵坐标,以稀释比例为横坐标建立线性关系,分析细胞外囊泡浓度; S7.重复步骤S1-S5操作,不同的是在步骤S5中不通入洗脱溶液,而是通入细胞外囊泡膜蛋白抗体和PBS溶液;对选定反射干涉光谱波段进行谱线拟合,采用极值法拟合计算得到二氧化硅胶体晶体薄膜的光学厚度2和光学厚度3,分析相应细胞外囊泡膜蛋白表达量及其与抗体结合和解离的动力学。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人江苏大学,其通讯地址为:212013 江苏省镇江市京口区学府路301号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

以上内容由龙图腾AI智能生成。

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