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龙图腾网获悉广西中烟工业有限责任公司申请的专利一种基于LC-MS对不同硒水平下富硒烟-稻轮作土代谢组学研究的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN117074558B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-10发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202311044256.8，技术领域涉及：G01N30/02；该发明授权一种基于LC-MS对不同硒水平下富硒烟-稻轮作土代谢组学研究的方法是由贾海江;沈方科;韦建玉;黄宏飞;黄崇峻;范晓苏;张纪利;蒋剑波;齐永杰;石保峰;李俊霖;黄群秀设计研发完成，并于2023-08-17向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于LC-MS对不同硒水平下富硒烟-稻轮作土代谢组学研究的方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种基于LC‑MS对不同硒水平下富硒烟‑稻轮作土代谢组学研究的方法，包括以下步骤，步骤一：盆栽试验设计；步骤二：土壤样品采集；步骤三：土壤代谢物的提取；步骤四：仪器条件设置；步骤五：液相色谱‑质谱联用仪检测；步骤六：数据处理及分析。本发明利用代谢组学研究硒的不同量对土壤样品中17种常见氨基酸及4种有机酸含量的影响，为硒在烟草生产中的科学施肥方式提供理论参考依据，有利于开发富硒高品质烟叶，这在工业、农业、商业上具有重要的意义。

本发明授权一种基于LC-MS对不同硒水平下富硒烟-稻轮作土代谢组学研究的方法在权利要求书中公布了：1.一种基于LC-MS对不同硒水平下富硒烟-稻轮作土代谢组学研究的方法，其特征在于，包括以下步骤： 步骤一：盆栽试验设计； 步骤二：土壤样品采集； 步骤三：土壤代谢物的提取； 步骤四：仪器条件设置； 步骤五：液相色谱-质谱联用仪检测； 步骤六：数据处理及分析； 步骤一中盆栽试验设计方法，包括以下步骤： 称重15kg分别装入18cm×40cm的塑料盆内并保留桶沿与土面之间5cm的储水空间，每组土壤加入5000mgL的硒溶液，使土壤含硒量为：0、0.6、1.2、2.4、4.8、9.6mgkg，每个处理设6次重复，共有180盆并采用随机区组排列的方式进行摆放，每一处理均在一年内烟-稻轮作，即在一年之中连续种植一季春烟和一季晚稻，在晚稻收割完后采集土壤样品； 步骤二中土壤样品采集的方法，包括以下内容： 在采集土壤样品时先除去3mm的表层土壤，用土钻竖直向下钻取深度至20mm处的土壤，避免根系残渣、碎石杂质，并将土样初步碾碎混匀放入密封袋中，置于-80℃冰箱中保存； 将采得的土壤样品分为两份，分别进行冷冻干燥与自然风干处理，干燥后的样品置于-80℃冰箱中低温保存； 步骤三中土壤代谢物的提取方法，包括以下步骤： 称取1g粉碎后的富硒烟-稻轮作土样品，加5ml60%甲醇水，充分振荡后超声提取45min，期间每隔15min振荡一次，保证土壤与甲醇水充分接触；10000r·min-1离心3min，过0.22μm有机滤膜，取1.5ml上清液待测； 步骤四中仪器条件设置，包括质谱条件设置和色谱条件设置； 质谱条件的设置如下： 扫描模式：MSEContinue正离子、负离子；离子源：ESI；质量扫描范围：50-1200Da；雾化气：氮气；碰撞气：氩气；毛细管电压：3kV；锥孔电压：40；源偏移电压：80；离子源温度：100℃；脱溶剂气体温度：450℃；锥孔气体流量：50Lh；脱溶剂气体流速：650Lh；碰撞能量：低能量：关，高能量：10-40V；校正液：亮氨酸脑啡肽，正离子：mz556.2771；负离子：mz554.26154； 色谱条件的设置如下： 色谱柱：WatersACQUITYUPLCBEHC18；柱温：40℃；柱流量：0.3mlmin；进样量：2μL；流动相：A：0.1%甲酸水、B：甲醇。

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