中国科学院微生物研究所李明获国家专利权
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龙图腾网获悉中国科学院微生物研究所申请的专利一种偶联的CRISPR和毒素-抗毒素元件及其在消杀耐药细菌中的应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115960895B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-10发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210947272.7,技术领域涉及:C12N15/113;该发明授权一种偶联的CRISPR和毒素-抗毒素元件及其在消杀耐药细菌中的应用是由李明;王锐;舒宪;程飞跃;杨俊设计研发完成,并于2022-08-09向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种偶联的CRISPR和毒素-抗毒素元件及其在消杀耐药细菌中的应用在说明书摘要公布了:本发明属于基因工程领域,具体公开通过联用CRISPR及其偶联的毒素‑抗毒素元件以及对耐药细菌实现精准高效消杀的新型杀菌方法。本发明创新性地利用CRISPR的护卫RNA元件CreTA提高CRISPR‑Cas元件在消杀耐药菌过程中的稳定性,实现CRISPR和TA双重杀菌效应,从而有效提高CRISPR杀菌技术在实际应用中的效率。
本发明授权一种偶联的CRISPR和毒素-抗毒素元件及其在消杀耐药细菌中的应用在权利要求书中公布了:1.一种由毒素元件和抗毒素元件组合构成的偶联元件,其中所述毒素元件和抗毒素元件直接连接,或者分别在同一载体的不同位置,或者分别在不同载体上偶联构成所述元件;其中毒素元件含有启动子序列,SD序列及mini-ORF毒素序列元件,用于表达毒素;抗毒素元件含有启动子序列和类mini-CRISPR结构,可经转录加工产生CreARNA;所述毒素元件的启动子为PcreT启动子,所述抗毒素元件的启动子为PcreA启动子,所述毒素元件和抗毒素元件来源于不动杆菌; 所述类mini-CRISPR结构的第一个repeat序列不保守但有保守的茎环结构,第二个repeat序列和结构都非常保守; 所述PcreT启动子的序列如下: TACTTAGTAATGATAAGTCTTTTTATTTTACATAGAAATAGCTTGTGGAATAAAAGAAAAATCTGTATTTTACTTGTTATGGTTACTTTTAGTTTGAATTAAAGTAACTAGGTTTAATATTTAAATAAAGATTAACCATCGATCTGGCAGGATCACACATCACCCGATAGGG; 所述PcreA启动子序列如下: ATACAGATTTTTCTTTTATTCCACAAGCTATTTCTATGTAAAATAAAAAGACTTATCATTACTAAGTA; 所述SD序列及mini-ORF毒素序列元件的序列如下: TAAGGGGGAAATAATGTTTAGCACGCATTTAATCAGAAGGGTCTGA; 所述类mini-CRISPR结构的序列如下: AGGCACTACCATAAAGGTAGCTTAGAAATAGTTCCTTTTATTCAATCTGTTCATGGCGGCATACGCCATTTAGAAA; 所述毒素元件的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示: TACTTAGTAATGATAAGTCTTTTTATTTTACATAGAAATAGCTTGTGGAATAAAAGAAAAATCTGTATTTTACTTGTTATGGTTACTTTTAGTTTGAATTAAAGTAACTAGGTTTAATATTTAAATAAAGATTAACCATCGATCTGGCAGGATCACACATCACCCGATAGGGTAAGGGGGAAATAATGTTTAGCACGCATTTAATCAGAAGGGTCTGA; 所述抗毒素元件的核苷酸序列如SEQIDNO:2所示: ATACAGATTTTTCTTTTATTCCACAAGCTATTTCTATGTAAAATAAAAAGACTTATCATTACTAAGTAAGGCACTACCATAAAGGTAGCTTAGAAATAGTTCCTTTTATTCAATCTGTTCATGGCGGCATACGCCATTTAGAAA。
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