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龙图腾网获悉暨南大学申请的专利一种高通量筛选复杂体系中新型冠状病毒膜融合抑制剂的方法及其应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN117554507B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-03发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202311306882.X，技术领域涉及：G01N30/02；该发明授权一种高通量筛选复杂体系中新型冠状病毒膜融合抑制剂的方法及其应用是由江正瑾;袁嘉明;汪锦才;张婷婷;陈芝蓄设计研发完成，并于2023-10-10向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种高通量筛选复杂体系中新型冠状病毒膜融合抑制剂的方法及其应用在说明书摘要公布了：本发明提供了一种高通量筛选新型冠状病毒膜融合抑制剂的方法及其应用。本发明所公开的基于荧光偏振技术结合高分辨活性轮廓分析平台的方法应用于金银花提取物中进行新型冠状病毒膜融合抑制剂的筛选，此前尚未有研究直接从天然产物中高通量筛选新型冠状病毒膜融合抑制剂单体。该技术通过结合兼容384孔板的荧光偏振技术与高分辨活性轮廓分析平台，首次从金银花中快速筛选得到19个活性成分，通过结合半制备液相及不同分离机理的色谱柱对主要活性段进行再次筛选和鉴定，从中准确鉴定并验证了异绿原酸A、异绿原酸C、金丝桃苷以及木犀草苷的体外抑制活性及其抗SARS‑CoV‑2假病毒活性研究。

本发明授权一种高通量筛选复杂体系中新型冠状病毒膜融合抑制剂的方法及其应用在权利要求书中公布了：1.一种高通量筛选新型冠状病毒膜融合抑制剂的方法，其特征在于包括如下步骤： 1将样品进行萃取及简化； 2将萃取及简化后得到的样品注入高分辨活性轮廓分析平台，样品通过平台中的液相色谱柱后分离后，柱后流分一分为二，其中一部分流分进入二极管阵列检测器及质谱仪，余下的流分进入微流分收集装置，微流分收集装置将流分按照设定的程序依次收集于微孔板中； 3待上述微孔板中的流分真空干燥后，使用电子移液器加入NusA-5-HB蛋白溶液，孵育，之后加入HR2-FL溶液继续孵育，孵育结束后测定其荧光偏振强度，结合液相色谱仪质谱仪检测结果，即可实现活性成分的实时筛选和结构鉴定； 步骤1所述的萃取的具体步骤为： 取30.0g样品粉末，以300mL70%乙醇在50℃下超声提取三次，每次10min；待超声结束后，合并所有提取液，利用旋转蒸发仪在45℃下以150rpm蒸干溶剂，得到无醇味浓缩液；随后，加入150mL纯水以混悬浓缩液，依次用石油醚和乙酸乙酯等比例萃取，减压浓缩后得到乙酸乙酯层提取物； 步骤1所述的简化的具体步骤为： 以含25%DMSO的70%MeOH配制50mg·mL-1的样品乙酸乙酯提取物后，使用0.22μm有机滤膜过滤，每次注入200μL样品于半制备液相中进行分离和分段收集；色谱柱为中谱科技RD-C18柱；流动相A为0.1%甲酸-水，B为0.1%甲酸-甲醇；进样量200μL；流速2.5mL·min-1；柱温30℃；检测波长254nm；梯度条件为：0min-20%B，5min-30%B，35min-51%B，50min-95%B，70min-98%B；取30～40min的洗脱液，得到简化后的样品； 步骤2所述的液相色谱柱为小粒径RD-C18柱、AQ-C18柱和RD-Phenyl柱； 所述的小粒径RD-C18柱的液相条件为： 流动相A为0.1%甲酸-水，B为0.1%甲酸-甲醇；进样量20μL；流速0.5mL·min-1；柱温30℃；检测波长254nm；梯度为0min-20%B，5min-30%B，35min-51%B，50min-95%B，70min-98%B； 所述的AQ-C18柱的液相条件为： 流动相A为0.1%甲酸-水，B为0.1%甲酸-乙腈；进样量20μL；流速0.5mL·min-1；柱温30℃；检测波长254nm；梯度为0min-10%B，20min-25%B，35min-25%B，60min-28%B； 所述的RD-Phenyl柱的液相条件为： 流动相A为0.1%甲酸-水，B为0.1%甲酸-甲醇；进样量20μL；流速0.5mL·min-1；柱温30℃；检测波长254nm；梯度为0min-30%B，10min-40%B，50min-45%B，65min-95%B，70min-98%B。

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