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龙图腾网获悉福建农林大学申请的专利一种检测河豚毒素的乳胶微球免疫层析试纸条及其应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116338170B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-03发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310016526.8，技术领域涉及：C12N5/12；该发明授权一种检测河豚毒素的乳胶微球免疫层析试纸条及其应用是由凌素美;黄永铭;汪世华;徐杨;徐爱迪;孙梦晗;王荣智设计研发完成，并于2023-01-06向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种检测河豚毒素的乳胶微球免疫层析试纸条及其应用在说明书摘要公布了：本发明提供一种检测河豚毒素的乳胶微球免疫层析试纸条及其应用，属于海洋毒素快速检测领域。所述乳胶微球免疫层析试纸条包括以下组分：塑料外壳、样品垫、免疫探针结合垫、硝酸纤维膜和吸水垫；所述免疫探针结合垫滴加有抗河豚毒素单克隆抗体标记的乳胶微球免疫探针；所述抗河豚毒素单克隆抗体由抗河豚毒素单克隆抗体杂交瘤细胞株5B9分泌，杂交瘤细胞株5B9保藏号为CGMCCNo.45320。该乳胶微球免疫层析试纸条，检测阈值为1000ngmL，检测限为7.8125ngmL，特异性强，灵敏度高，重复性良好，性能稳定，操作要求低，非常适用于食品中快速检测，对监测河豚毒素具有重要意义。

本发明授权一种检测河豚毒素的乳胶微球免疫层析试纸条及其应用在权利要求书中公布了：1.一种检测河豚毒素的乳胶微球免疫层析试纸条，其特征在于：所述乳胶微球免疫层析试纸条包括以下组分：塑料外壳、样品垫、免疫探针结合垫、硝酸纤维膜和吸水垫；所述免疫探针结合垫上滴加有抗河豚毒素单克隆抗体标记的乳胶微球免疫探针；所述抗河豚毒素单克隆抗体由抗河豚毒素单克隆抗体杂交瘤细胞株5B9分泌；所述抗河豚毒素单克隆抗体杂交瘤细胞株5B9已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2022年9月28日，保藏号为CGMCCNo.45320； 所述的一种检测河豚毒素的乳胶微球免疫层析试纸条的制备方法包括以下步骤： 1抗河豚毒素单克隆抗体标记的乳胶微球免疫探针的制备：取15μL聚苯乙烯乳胶微球悬浊液，加入1mL浓度为0.05M、pH为6.0的MES缓冲液，于4℃、12000rpm离心10min；弃上清，沉淀用1mL浓度为0.05M、pH为6.0的MES缓冲液重悬，后加入1.5mgEDC，于25℃、160rpm恒温摇床条件下震荡反应15min，再12000rpm、4℃条件下离心10min；弃上清，沉淀用0.5mL浓度为50gL、pH为6.5的甘氨酸缓冲液悬浮，后加入10μL浓度为1.25mgmL的抗河豚毒素单克隆抗体，在室温条件下置于160rpm摇床孵育2h；孵育完成后于4℃、12000rpm条件下离心2次，每次10min；弃上清，向沉淀中加入1mL浓度为50gL、pH为6.5的甘氨酸缓冲液，于室温160rpm条件下震荡30min用于淬灭微球；再4℃、12000rpm条件下离心2次，每次10min；弃上清，沉淀用20μL浓度为50gL、pH为6.5的甘氨酸缓冲液吹起，即制得抗河豚毒素单克隆抗体标记的乳胶微球免疫探针，置于4℃备用； 2免疫探针结合垫与样品垫的预处理：将未处理的免疫探针结合垫和样品垫剪成宽1.3cm的长条状，将其置于大培养皿中，用提前配好的封闭液淹没2h，随后转移到37℃恒温培养箱封闭2h，从培养箱取出后滤去封闭液并继续置于培养箱37℃烘干，烘干后于4℃保存；后续使用按照长为1.3cm，宽为4mm裁剪；所述封闭液的组成为：5wt%BSA+1vol%Tween-20； 3硝酸纤维素膜划线：取羊抗鼠二抗在硝酸纤维素膜上进行划C线，最终划在C线上羊抗鼠二抗的浓度为0.5mgmL，经过裁剪后，每张宽4mm的卡条上划线羊抗鼠二抗的含量为32ng；取完全抗原OVA-TTX在硝酸纤维素膜上进行划T线，最终划在T线上完全抗原OVA-TTX的浓度为32.80mgmL，经过裁剪后，每张宽4mm的卡条上划线完全抗原OVA-TTX的含量为20.992ng；在同一张硝酸纤维素膜上，C、T线之间距离为0.5cm； 4免疫探针结合垫的制备：在预处理后的免疫探针结合垫上滴加4μL步骤1制备的抗河豚毒素单克隆抗体标记的乳胶微球免疫探针； 5免疫层析试纸条的组装：将步骤3划线后的硝酸纤维素膜、步骤4制备的免疫探针结合垫、步骤2预处理的样品垫、吸水垫，依次组装在底板上；其中免疫探针结合垫和样品垫重叠交错粘贴，同端相隔2mm，吸水垫与硝酸纤维素膜首尾重叠2mm，盖上塑料外壳盖子，干燥封装，置4℃保存。

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