中国科学院化学研究所姚立获国家专利权
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龙图腾网获悉中国科学院化学研究所申请的专利一种细胞间粘附力的超低场磁测定方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116297166B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-03发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310024116.8,技术领域涉及:G01N19/04;该发明授权一种细胞间粘附力的超低场磁测定方法是由姚立;展金秀设计研发完成,并于2023-01-09向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种细胞间粘附力的超低场磁测定方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种细胞间粘附力的超低场磁测定方法。利用磁小体为探针进行细胞‑细胞粘附力的超低场测量。本发明中所采用的磁小体探针具有易大量制备、高剩磁性和生物相容性的特点。本发明可以实现高通量、高灵敏度的细胞间粘附力测量。通过比较细胞间粘附力大小来判断肿瘤细胞的转移能力。本发明模拟体内环境构建细胞间粘附体系,所采用磁探针对细胞间粘附无干扰,测量值更接近真实环境。
本发明授权一种细胞间粘附力的超低场磁测定方法在权利要求书中公布了:1.一种细胞-细胞粘附力的超低场测量方法,包括如下步骤: 1下层细胞与基底的稳定粘附:将细胞接种于纤连蛋白修饰的基底中培养至单层融合状态,得到与基底稳固粘附的下层细胞; 2上层细胞的磁探针标记:将上层细胞与磁小体探针共孵育,得到磁探针标记的细胞; 3细胞间粘附体系的构建:将步骤2中磁探针标记的细胞接种于步骤1中与基底形成稳定粘附的下层细胞上培养,并进行磁化; 4细胞间粘附力的测量:外力干扰步骤3所得细胞间粘附体系使得上层细胞与下层细胞分离,并通过超低场磁力仪记录解离过程的剩磁信号变化谱图; 其中,将剩磁信号下降一半时所对应的力定义为细胞间粘附力; 步骤1中,所述基底的材料采用聚二甲基硅烷; 所述基底为一长方体; 所述基底的表面设有一凹槽; 所述纤连蛋白修饰的基底通过如下方法制备得到: 将所述基底用纤连蛋白孵育,去除纤连蛋白溶液并用细胞完全培养基清洗纤连蛋白修饰后基底,即得, 其中,所述纤连蛋白的浓度为20~50μgmL; 所述孵育的温度为4℃-37℃,时间为2h-12h; 所述细胞培养的温度为35-37℃,时间为10~24h; 步骤2中,所述上层细胞为癌细胞, 所述磁小体来源于趋磁细菌; 所述磁小体通过包括如下步骤的方法制备得到:取趋磁细菌样品,于PBS缓冲液中超声破碎,破碎后的细胞采用磁铁吸附,分离沉淀,即得磁小体; 所述细胞与磁小体探针的配比为1×106个:20-500μg; 所述共孵育的温度为35-37℃,时间为2~12h; 步骤3中,上层细胞与下层细胞的个数比为0.3~2:1; 上层细胞与下层细胞培养时间为30min~1h; 所述磁化为采用磁铁进行磁化; 步骤4中,所述外力为离心力,所述离心力的强度为12pN-163pN。
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