海南医学院李乐获国家专利权
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龙图腾网获悉海南医学院申请的专利一种四倍体小粒种咖啡根部分生组织染色体制备方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116296660B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-03发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310076342.0，技术领域涉及：G01N1/28；该发明授权一种四倍体小粒种咖啡根部分生组织染色体制备方法是由李乐;唐天乐;夏乾峰设计研发完成，并于2023-02-07向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种四倍体小粒种咖啡根部分生组织染色体制备方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种四倍体小粒种咖啡根部分生组织染色体制备方法。属于遗传学和基因组学技术领域。本发明描述了如何获得具有丰富有丝分裂中期染色体的根尖分生组织方案。对采样前的植株培育、根尖采样和固定、染色体分离和扩散所涉及的步骤和参数均做了详细说明。
本发明授权一种四倍体小粒种咖啡根部分生组织染色体制备方法在权利要求书中公布了：1.一种四倍体小粒种咖啡根部分生组织染色体制备方法，其特征在于，包括如下步骤： 1植株的培育 将植株培育至20～40cm的幼苗备用； 2根尖采样和固定 21每天日出后4～4.5h或温室内灯光开始照射后4～4.5h，采集根部末端白色的新生根尖组织； 22无菌蒸馏水冲洗后取1～1.5cm根尖组织； 23将根尖组织使用饱和的0.05％α-溴代萘水溶液处理，22～25℃放置2h，之后4℃放置4h； 24使用根尖固定剂处理，22～25℃放置2h，之后4℃放置2d以上； 3染色体分离和扩散 31根尖分生组织预处理 311清洗固定后的根尖组织，之后使用HCl进行软化处理； 312使用酶缓冲液清洗后，使用酶溶液37℃下孵育35min； 313酶缓冲液清洗后滴加无菌蒸馏水以保持湿润； 32解剖根尖分生组织 321将经过预处理的根尖组织使用60％乙酸作为介质处理3min； 322使用无菌针头将根冠以下超过0.1cm的部分分离并去除； 323挤压分离单个细胞，获得单层染色体。
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