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龙图腾网获悉江汉大学申请的专利一种去除扩增子测序中扩增产物残余污染的方法及其应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116162684B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-03发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310128111.X，技术领域涉及：C12Q1/6806；该发明授权一种去除扩增子测序中扩增产物残余污染的方法及其应用是由高利芬;周俊飞;彭海;李论;方治伟;李甜甜;陈利红;肖华锋;万人静;宋会银设计研发完成，并于2023-02-17向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种去除扩增子测序中扩增产物残余污染的方法及其应用在说明书摘要公布了：本申请涉及基因测序技术领域，尤其涉及一种去除扩增子测序中扩增产物残余污染的方法及其应用，所述方法包括：在构建待测样本的测序文库的第一步PCR反应体系中加入DNASpike‑ins，后以第一多重扩增引物进行第一步PCR扩增，得到第一扩增产物；向所述第一扩增产物中加入第二步PCR反应体系和第二PCR扩增引物，并进行第二步PCR扩增，得到测序文库；DNASpike‑ins依据待测样本中目标生物的基因组标记位点的序列设计并合成；第一步PCR反应体系包括dUTP和UDG；第二步PCR反应体系包括dUTP；通过在第一步PCR反应体系中加入DNASpike‑ins，减少扩增产物残余污染的扩增，再在每步PCR反应体系中加入dUTP，并在第一步PCR反应体系中加入UDG，能降解含尿嘧啶的PCR产物，去除扩增产物残余污染。

本发明授权一种去除扩增子测序中扩增产物残余污染的方法及其应用在权利要求书中公布了：1.去除扩增子测序中扩增产物残余污染的方法，其特征在于，所述方法包括： 在构建待测样本的测序文库的第一步PCR反应体系中加入DNASpike-ins，后以第一多重扩增引物进行第一步PCR扩增，得到第一扩增产物；向所述第一扩增产物中加入第二步PCR反应体系和第二PCR扩增引物，并进行第二步PCR扩增，得到去除了扩增产物残余污染的测序文库； 其中，所述DNASpike-ins是依据测样本中目标生物的基因组标记位点的序列设计并合成的； 所述第一步PCR反应体系包括dUTP和尿嘧啶DNA糖基化酶； 所述第二步PCR反应体系包括dUTP； 所述DNASpike-ins的片段包括引物区和扩增区，所述引物区和所述基因组标记位点的引物区相同，所述扩增区的碱基组成和所述基因组标记位点的碱基组成相同但排布不同； 所述DNASpike-ins每反应的拷贝数≥10000； 所述第一步PCR反应体系还包括dTTP； 所述第二步PCR反应体系还包括dTTP。

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