乐山恒峰华邦生物科技有限公司赵琦锴获国家专利权
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龙图腾网获悉乐山恒峰华邦生物科技有限公司申请的专利一种提高植物乳杆菌稳定性的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120624294B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-31发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510839530.3,技术领域涉及:C12N1/20;该发明授权一种提高植物乳杆菌稳定性的方法是由赵琦锴;王涛;王景峰;毛丹设计研发完成,并于2025-06-23向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种提高植物乳杆菌稳定性的方法在说明书摘要公布了:本发明提供一种提高植物乳杆菌稳定性的方法,涉及植物乳杆菌制备工艺领域。该提高植物乳杆菌稳定性的方法的工艺步骤为菌株筛选,从传统发酵食品泡菜中分离候选菌株,将泡菜样品放入进行稀释,稀释后的泡菜样品涂抹至MRS固体培养基中放入厌氧培育箱中,调节至36摄氏度厌氧培养36小时,挑取单菌落进行革兰氏染色和过氧化氢酶试验鉴定乳酸菌,将菌液置于pH3.0的MRS液体培养基中静置3小时筛选存活率大于85%的菌株。本发明通过利用壳聚糖‑海藻酸钠静电吸附原理,构建pH响应型微胶囊,在酸性环境中胶囊外壳快速溶胀释放菌株,而在碱性环境中保持结构完整,使菌株在模拟胃肠液中定植率提升70%。
本发明授权一种提高植物乳杆菌稳定性的方法在权利要求书中公布了:1.一种提高植物乳杆菌稳定性的方法,其特征在于:所述提高植物乳杆菌稳定性的工艺步骤如下: 步骤1:菌株筛选,从传统发酵食品泡菜中分离候选菌株,将泡菜样品放入进行稀释,稀释后的泡菜样品涂抹至MRS固体培养基中放入厌氧培育箱中,调节至36摄氏度厌氧培养36小时,挑取单菌落进行革兰氏染色和过氧化氢酶试验鉴定乳酸菌,将菌液置于pH3.0的MRS液体培养基中静置3小时筛选存活率大于85%的菌株; 步骤2:菌株活化,将筛选出的菌株接种于含25%甘油的MRS液体培养基,零下65摄氏度冷冻24小时后,将冻干菌种接种于15mLMRS液体培养基,36℃厌氧培养48小时,再按5%接种量转接至100mLMRS液体培养基,36℃厌氧培养24小时; 步骤3:胁迫预处理,在菌株种子液中添加浓度为0.5%的氯化钠溶液,放置于36摄氏度的温度中静置3小时,诱导渗透应激蛋白表达,提高细胞渗透压耐受性: 步骤4:高密度发酵,将预处理后的发酵菌株放入培养基中进行乳杆菌培养,培养条件设置为36摄氏度,湿度为50%的培养箱中,培养箱内设置为氧气浓度低于5%的微氧环境,空气流量为0.2vvm,培养36小时至OD600nm>2.5: 步骤5:保护剂制备,保护剂配置配方为浓度为16.29g100mL脱脂乳,浓度为10.85g100mL的海藻糖,浓度为0.07g100mL的硫酸锰,配置过程于30摄氏度以下的常温环境,将保护剂预菌株发酵液按1.5:1的比例混合均匀后放置于培养箱中静置12小时,检测菌株存活率大于85%; 步骤6:乳杆菌体浓缩,将与保护剂充分混合后的菌株发酵液放入离心机中进行离心作用,将上清液离心取出,保留菌悬液,再将菌悬液放入试剂管中进行零下70摄氏度的冷冻6小时,再将冷冻后的菌悬液进行干燥处理; 步骤7:微胶囊封装,将浓缩后的冷冻菌株干粉用无菌水重悬至15CFUmL,微胶囊的内壁使用2%海藻酸钠溶液与1%的阿拉伯胶按照1:2的比例配置,灭菌后冷却至40摄氏度冷冻浓缩制备而成,微胶囊的外壁使用浓度为1%的壳聚糖溶液与0.5%的柠檬酸按照1:1的比例配置,再将菌悬液冻干粉与微胶囊的内壁按照1:5的比例混合; 步骤8:成品存储,采用铝箔袋真空包装将微胶囊进行真空存储,并在真空袋中内置干燥剂,放置于温度≤30摄氏度,空气湿度≤35%的阴凉干燥处进行避光存储得到高稳定性的植物乳杆菌。
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