湖南华科生物科技有限公司黄海红获国家专利权
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龙图腾网获悉湖南华科生物科技有限公司申请的专利一种脐带源间充质干细胞外泌体制剂、制备方法及在制备骨关节炎药物中的应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120464568B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-31发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510684773.4,技术领域涉及:C12N5/0775;该发明授权一种脐带源间充质干细胞外泌体制剂、制备方法及在制备骨关节炎药物中的应用是由黄海红;赵洪斌设计研发完成,并于2025-05-26向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种脐带源间充质干细胞外泌体制剂、制备方法及在制备骨关节炎药物中的应用在说明书摘要公布了:本发明涉及生物医药技术领域,具体涉及一种脐带源间充质干细胞外泌体制剂、制备方法及在制备骨关节炎药物中的应用。该制剂由该方法制得。该方法包括采用预处理剂对脐带源间充质干细胞进行预处理;弃去所述预处理剂,对所述预处理后的脐带源间充质干细胞进行梯度离心处理,得到外泌体沉淀;将所述外泌体沉淀重悬于含蛋白酶抑制剂的缓冲液中,得到脐带源间充质干细胞外泌体制剂。该应用为该制剂在制备骨关节炎药物中的应用。本发明解决了常规培养方法获得的EXO存在产量低和功能异质性的问题。
本发明授权一种脐带源间充质干细胞外泌体制剂、制备方法及在制备骨关节炎药物中的应用在权利要求书中公布了:1.一种脐带源间充质干细胞外泌体制剂的制备方法,其特征在于,包括: 步骤S1、采用预处理剂对脐带源间充质干细胞进行预处理;所述预处理剂由黄芪甲苷、丹参酮IIA和淫羊藿苷组成,且三者的摩尔比为10:5:20;所述黄芪甲苷的纯度≥98%,所述丹参酮IIA纯度≥98%,所述淫羊藿苷的纯度≥95%; 步骤S2、弃去所述预处理剂,对所述预处理后的脐带源间充质干细胞进行梯度离心处理,得到外泌体沉淀; 步骤S3、将所述外泌体沉淀重悬于含蛋白酶抑制剂的缓冲液中,得到脐带源间充质干细胞外泌体制剂; 所述预处理包括采用无血清DMEMF12培养基稀释所述预处理剂,将所述黄芪甲苷、所述丹参酮IIA和所述淫羊藿苷的摩尔浓度分别稀释成10μM、5μM和20μM;将第3~5代脐带源间充质干细胞接种于多孔板中,细胞贴壁后更换无血清DMEMF12培养基同步化培养12~24h,再加入含有所述预处理剂的所述无血清DMEMF12培养基;在培养温度为37℃、体积百分数为5%CO2的培养箱中培养,培养时间为24~48h; 所述第3~5代脐带源间充质干细胞的培养方法包括: 首先,将脐带样本经生理盐水多次清洗并剪成2~3cm小段,剔除血管后纵向剖开,分离华通胶组织,剪碎至1~2mm3组织块; 其次,将组织块均匀铺于培养瓶中,加入含血清DMEMF12培养基,在培养温度为37℃、体积百分数为5%CO2的培养箱中培养; 然后,培养24~48h后,更换所述含血清DMEMF12培养基,去除未贴壁细胞,即培养出第1代脐带源间充质干细胞; 最后,每2~3天更换一次所述含血清DMEMF12培养基,直至培养出所述第3~5代脐带源间充质干细胞; 所述梯度离心处理包括依次进行且离心力和离心时间依次递增的第一离心处理、第二离心处理和第三离心处理; 所述第一离心处理采用的离心力为300~500×g,采用的离心时间为10~20min; 所述第二离心处理采用的离心力为2000~5000×g,采用的离心时间为20~30min; 所述第三离心处理采用的离心力为100000×g,采用的离心时间为50~70min。
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