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硅羿科技(上海)有限公司唐雪明获国家专利权

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龙图腾网获悉硅羿科技(上海)有限公司申请的专利一种提纯dsRNA的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115404236B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-31发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211221681.5,技术领域涉及:C12N15/10;该发明授权一种提纯dsRNA的方法是由唐雪明;秦斌钰;肖建辉设计研发完成,并于2022-10-08向国家知识产权局提交的专利申请。

一种提纯dsRNA的方法在说明书摘要公布了:本发明提供了一种提纯dsRNA的方法,将大肠杆菌发酵后的菌体破碎并离心分离,获取液相,液相经中空纤维柱过滤,所得滤液经缓冲液调节电导率和pH后即为上样样品,最后上样样品经过柱层析的梯度洗脱获取dsRNA。该提纯方法获得的dsRNA纯度在90%以上,由于步骤简单,收率达到85%以上;提纯方法未使用有机溶剂和昂贵的蛋白纯化平台,绿色环保,经济节能;可以轻松的等比例放大,从1L放大到100L,且规模化之后效果更好。

本发明授权一种提纯dsRNA的方法在权利要求书中公布了:1.一种提纯dsRNA的方法,其特征在于,包括以下步骤: 1样品预处理,向大肠杆菌发酵后的菌体中加入由600mM的氯化铵和450mM的氯化钾按体积比1:6~6:1配制而成的缓冲液1调节pH为5-9,搅拌使菌体分散悬浮,使用高压均质机将分散的菌体破碎,再经离心机高速离心后收集液相; 2样品再处理,向液相中加入盐,搅拌溶解,低温0-4℃放置至分层;倒出的上清液,经滤膜孔径为0.45-5μm的中空纤维柱过滤,获得滤液;使用由350mM的氯化钾、110mM的磷酸二氢钾和10mM的三羟甲基氨基甲烷按体积比10:5:3~30:2:1配制而成的缓冲液2调节滤液电导率为48-55Sm,使用由300mM的氯化钾、50mM的磷酸二氢钾和10mM的三羟甲基氨基甲烷按体积比1:5:3~10:2:1配制而成的缓冲液3调节滤液pH为5-9,即获得上样样品;所述步骤2中所述的盐选自硫酸钠、硫化铵或氯化铵中的一种或多种; 3获取dsRNA,上样样品经蠕动泵上样,至柱层析中的填料吸附饱和,采用浓度递增的缓冲液4进行三次梯度洗脱,第三次洗脱收集样品; 其中,缓冲液4按以下三种浓度梯度配制:缓冲液4-1:由350mM的氯化钾和20mM的三羟甲基氨基甲烷按体积比1:3-10:1配制而成;缓冲液4-2:由375mM的氯化钾和25mM的三羟甲基氨基甲烷按体积比1:3-10:1配制而成;缓冲液4-3:由375mM的氯化钾和40mM的三羟甲基氨基甲烷按体积比1:3-10:1配制而成; 所述填料为表面改性的二氧化硅,由粒径为5-25μm的填料1、粒径为25-55μm的填料2和粒径为55-95μm的填料3按体积比1:3:5-1:1:1组成。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人硅羿科技(上海)有限公司,其通讯地址为:201314 上海市浦东新区新场镇新浩路43号C区;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

以上内容由龙图腾AI智能生成。

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