深圳市人民医院;胡立夫胡立夫获国家专利权
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龙图腾网获悉深圳市人民医院;胡立夫申请的专利一种用于结直肠癌检测的组合标志物及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116121387B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-27发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310057899.X,技术领域涉及:C12Q1/6886;该发明授权一种用于结直肠癌检测的组合标志物及其应用是由胡立夫;南熠郎设计研发完成,并于2023-01-19向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种用于结直肠癌检测的组合标志物及其应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种用于结直肠癌检测的组合标志物及其应用,组合标志物由ALX4基因、SFRP2基因、SEPT9基因、SDC2基因和TFPI2基因组成。实验证明,ALX4基因、SFRP2基因、SEPT9基因、SDC2基因和TFPI2基因五个基因用组合方式于诊断早期结直肠癌且操作简单、耗时短、具有较高的灵敏度和特异性,同时可以有效提高检出率,并减少结果的假阳性。本发明具有重要的应用价值。
本发明授权一种用于结直肠癌检测的组合标志物及其应用在权利要求书中公布了:1.组合标志物检测试剂在制备结直肠癌血液多通道荧光检测试剂盒中的应用; 所述组合标志物由ALX4基因、SFRP2基因、SEPT9基因、SDC2基因和TFPI2基因组成; ALX4基因的GeneBank为60529; SFRP2基因的GeneBank为6423; SEPT9基因的GeneBank为10801; SDC2基因的GeneBank为6383; TFPI2基因的GeneBank为7980; 所述组合标志物的检测试剂包括用于检测组合标志物中各个基因甲基化水平的引物和探针; 所述用于检测组合标志物中各个基因甲基化水平的引物分别为SEQIDNO:1所示的ALX4-F、SEQIDNO:2所示的ALX4-R、SEQIDNO:4所示的SERP2-F、SEQIDNO:5所示的SERP2-R、SEQIDNO:7所示的SEPTIN9-F、SEQIDNO:8所示的SEPTIN9-R、SEQIDNO:10所示的SDC2-F、SEQIDNO:11所示的SDC2-R、SEQIDNO:13所示的TFPI2-F和SEQIDNO:14所示的TFPI2-R; 所述用于检测组合标志物中各个基因甲基化水平探针分别为SEQIDNO:3所示的ALX4-P、SEQIDNO:6所示的SERP2-P、SEQIDNO:9所示的SEPTIN9-P、SEQIDNO:12所示的SDC2-P和SEQIDNO:15所示的TFPI2-P; 所述的结直肠癌血液多通道荧光检测试剂盒还包括内参基因检测试剂;所述内参基因为ACTB基因;ACTB基因的GeneBank为60;所述内参基因检测试剂包括检测内参基因的引物和探针; 所述试剂盒还包括数据处理系统;所述数据处理系统将组合标志物中各个基因的甲基化水平转化为待测者的dCTX,用于判断待测者是否为结直肠癌患者; 所述待测者的dCTX的计算方法为:将待测者的血浆的基因组DNA进行化学修饰,之后以其作为模板、采用引物和探针进行荧光PCR扩增,收集荧光信号,分别获得ALX4、SFRP2、SEPT9、SDC2、TFPI2和ACTB的CT值,依次记为CTALX4、CTSFRP2、CTSEPT9、CTSDC2、CTTFPI2和CTACTB;如果扩增曲线不为“S”型或CT值为空白,则CT值记为45;进一步计算各个基因ALX4、SFRP2、SEPT9、SDC2或TFPI2的dCT值,dCTX=CTx-CTACTB; 所述判断的方法为:如果待测者的ALX4、SFRP2、SEPT9、SDC2和TFPI2基因中至少两个基因发生甲基化,则待测者为结直肠癌患者;否则待测者不为结直肠癌患者;基因是否发生甲基化通过比较待测样本基因的dCT和dCT临界值来实现; 如果待测者ALX4基因、SFRP2基因、SEPT9基因、SDC2基因或TFPI2基因的dCT≤dCT临界值,则待测者基于该基因发生甲基化; 在所组成的PCR反应条件下,ALX4、SFRP2、SEPT9、SDC2和TFPI2的dCT临界值分别为5、5、5、5和5。
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