珠海丽珠试剂股份有限公司孙超获国家专利权
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龙图腾网获悉珠海丽珠试剂股份有限公司申请的专利细胞鉴定试剂盒和使用方法及其在鉴定肥大细胞中的应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115586333B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-27发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211240609.7,技术领域涉及:G01N33/569;该发明授权细胞鉴定试剂盒和使用方法及其在鉴定肥大细胞中的应用是由孙超;张胜杰;胡志强;曾敏霞设计研发完成,并于2022-10-11向国家知识产权局提交的专利申请。
本细胞鉴定试剂盒和使用方法及其在鉴定肥大细胞中的应用在说明书摘要公布了:本发明提供了一种细胞鉴定试剂盒和使用方法及其在鉴定肥大细胞中的应用,涉及细胞鉴定技术领域。该细胞鉴定试剂盒包括CD117抗体偶联磁微粒、CD16抗体偶联磁微粒和FcεRIα抗体偶联磁微粒,以及FcR阻断剂和洗脱液。该细胞鉴定试剂盒可用于鉴定细胞表面CD117、FcεRIα和CD16中的一种或多种,可获得纯度至少为90%的目标细胞。将其应用于鉴定细胞是否为CD117+FcεRIα+CD16‑肥大细胞,可获得纯度高于95%的目标细胞,同时提高肥大细胞的脱颗粒率,缓解了现有技术中存在的肥大细胞鉴定方法得到的肥大细胞的脱颗粒率较低的技术问题。
本发明授权细胞鉴定试剂盒和使用方法及其在鉴定肥大细胞中的应用在权利要求书中公布了:1.一种细胞鉴定试剂盒的使用方法,其特征在于,所述试剂盒用于分选脱颗粒率高的肥大细胞作为目标细胞; 所述细胞鉴定试剂盒包括抗体偶联磁微粒、FcR阻断剂和洗脱液; 所述抗体偶联磁微粒包括CD117抗体偶联磁微粒、CD16抗体偶联磁微粒和FcεRIα抗体偶联磁微粒; 所述CD117抗体偶联磁微粒,由质量比为100:1的磁微粒和CD117抗体偶联得到; 所述CD16抗体偶联磁微粒,由质量比为100:1的磁微粒和CD16抗体偶联得到; 所述FcεRIα抗体偶联磁微粒,由质量比为100:1的磁微粒和FcεRIα抗体偶联得到; 所述洗脱液含有50mM磷酸二氢钠、50mM氯化钠、50mM甘氨酸、10%wv牛血清白蛋白和10Uml半胱氨酸蛋白酶; 所述目标细胞为CD117+FcεRIα+CD16-肥大细胞;所述方法包括串联使用FcεRIα抗体偶联磁微粒、CD117抗体偶联磁微粒和CD16抗体偶联磁微粒对待测细胞进行磁选; 所述待测细胞在磁选前,先经FcR阻断剂处理; 所述磁选包括将待测细胞与磁微粒混合并孵育,得到含有磁微粒和待测细胞的混合体系;固定含有磁微粒和待测细胞的混合体系中的磁微粒后,实施步骤Ⅰ或步骤Ⅱ: 步骤Ⅰ:使用穿流缓冲液清洗所述混合体系,收集清洗后的穿流缓冲液为收集液; 步骤Ⅱ:使用穿流缓冲液清洗所述混合体系,然后使用洗脱液洗脱余下混合体系,收集洗脱后的洗脱液作为收集液; 当使用CD16抗体偶联磁微粒进行磁选时,执行步骤Ⅰ;当使用CD117抗体偶联磁微粒或FcεRIα抗体偶联磁微粒进行磁选时,执行步骤Ⅱ; 所述收集液中的细胞为下一次磁选的待测细胞;最后一次磁选的收集液为最终收集液,最终收集液中收集到的细胞为所述目标细胞; 三种磁微粒串联使用的顺序选自A~D中的一种; A依次FcεRIα抗体偶联磁微粒、CD117抗体偶联磁微粒和CD16抗体偶联磁微粒; B依次CD117抗体偶联磁微粒、FcεRIα抗体偶联磁微粒和CD16抗体偶联磁微粒; C依次CD16抗体偶联磁微粒、FcεRIα抗体偶联磁微粒和CD117抗体偶联磁微粒; D依次CD16抗体偶联磁微粒、CD117抗体偶联磁微粒和FcεRIα抗体偶联磁微粒。
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