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龙图腾网获悉南京工业大学申请的专利一种提高脂肪酶溶剂耐受性的分子改造设计方法及其突变体获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN120758480B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-13发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510943007.5，技术领域涉及：C12N9/20；该发明授权一种提高脂肪酶溶剂耐受性的分子改造设计方法及其突变体是由胡燚;亓媛;陈志恒;年彬彬设计研发完成，并于2025-07-09向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种提高脂肪酶溶剂耐受性的分子改造设计方法及其突变体在说明书摘要公布了：本发明提供一种提高脂肪酶溶剂耐受性的理性设计方法。本发明的南极假丝酵母脂肪酶B突变体在10％vv吡啶溶剂中，耐受性最高提高为WT的5.5倍，在50％vv甲醇溶液、67.7％vvDMSO溶液和50％vv异丙醇溶液中耐受性均高于WT。优势突变D145N‑I285F、D145N‑I285D、T42K‑D145N‑I285D作为催化剂，在不同酶催化反应中合成效率均有提高。其中维生素E琥珀酸酯催化合成效率比WT提高了14.6％，植物甾醇酯催化合成效率最高比WT提高了18.0％，蔗糖月桂酸酯催化合成效率最高比WT提高了17.0％，葡萄糖月桂酸酯催化合成效率比WT提高19.5％。

本发明授权一种提高脂肪酶溶剂耐受性的分子改造设计方法及其突变体在权利要求书中公布了：1.一种提高脂肪酶溶剂耐受性的南极假丝酵母脂肪酶B突变体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： 1选择南极假丝酵母脂肪酶B作为改造对象；从蛋白质数据库PDB中获得待改造脂肪酶的晶体结构和氨基酸序列；所述南极假丝酵母脂肪酶B的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示； 2使用Fpocket和CaverDock软件确定南极假丝酵母脂肪酶B的通道和口袋，再经ConSurf软件排除了其中保守性过高位点，最终确定改造位点； 3对步骤2中确定的潜在靶标位点，采用NNK简并密码子设计引物，进行定点饱和突变，并采用对硝基苯酚法对改造的脂肪酶进行吡啶耐受性测定，筛选吡啶耐受性提高的单突变体； 4对步骤3中筛选出的单突变体，进行二重重组，并对二重突变体进行吡啶耐受性测定，并进行筛选； 5对步骤4筛选出的二重突变体进行进一步重组，以得到三重突变体，并在此基础上以对硝基苯酚法进行吡啶耐受性测定，并进行筛选； 6筛选后的突变体在如SEQIDNO.1所示的氨基酸序列上发生如下氨基酸突变中的任意一种：D145N-I285F、D145N-I285D、T42K-D145N-I285D；筛选后的突变体即为南极假丝酵母脂肪酶B突变体。

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