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龙图腾网获悉上海交通大学医学院附属瑞金医院申请的专利抗IgLON5抗体相关脑病主动免疫动物模型构建获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119563589B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-13发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411482856.7，技术领域涉及：A01K67/02；该发明授权抗IgLON5抗体相关脑病主动免疫动物模型构建是由陈晟;张仪纵横;何璐;周勤明;孟环宇;倪优;高一宁设计研发完成，并于2024-10-23向国家知识产权局提交的专利申请。

本抗IgLON5抗体相关脑病主动免疫动物模型构建在说明书摘要公布了：本发明提供了抗IgLON5抗体相关脑病主动免疫动物模型构建及应用，构建方法如下：体外构建PKN‑IgLON51‑313aa‑His8×重组质粒，将该质粒转染到HEK293S悬浮细胞中表达蛋白；收集细胞上清液，进行两次纯化后，置换蛋白溶剂为PBS；将IgLON5蛋白溶液与弗氏佐剂混合制备免疫乳剂，皮下注射小鼠，并通过百日咳毒素破坏血脑屏障，促进外周抗体侵入中枢神经系统，最终构建抗IgLON5抗体相关脑病主动免疫小鼠模型。本发明首次公开了抗IgLON5抗体相关脑病主动免疫动物模型的构建方法，填补了目前在抗IgLON5抗体相关脑病中，尚未有主动免疫模型的相关研究的空白，有助于还原抗体攻击中枢神经系统的全貌以及更为全面的进行认知、睡眠、运动障碍表型分析。

本发明授权抗IgLON5抗体相关脑病主动免疫动物模型构建在权利要求书中公布了：1.抗IgLON5抗体相关脑病主动免疫动物模型构建方法，其特征在于，包括如下步骤： A、体外构建PKN-IgLON5-His重组质粒 以pUC57-IgLON5质粒中IgLON5的1~939核苷酸序列以及PKN-His质粒序列为模板，分别设计IgLON5以及PKN-vector引物，引物序列如SEQIDNO.1~4所示；随后进行PCR扩增并进行产物验证；通过DNA无缝克隆构建PKN-IgLON5-His重组质粒，并转化感受态细胞，挑单克隆摇菌抽提质粒进行酶切和测序鉴定， 其中，1~939核苷酸对应IgLON5蛋白胞外段第1~313位点氨基酸序列；His标签为8×His标签； B、IgLON5重组蛋白合成及纯化 抽提PKN-IgLON5-His重组质粒并用无菌双蒸水稀释到1mgml，以DNA：PEI=1：6的比例采用PEI法瞬时转染一定体积的HEK293S细胞，转染4小时后，补加与细胞体积相同的培养基，混匀后分出一半体积于另一新的培养瓶中，置于摇床培养；转染24小时后，待细胞密度为3×106细胞ml时每瓶加入1500培养基体积的丙戊酸钠盐；转染48-72小时之间每瓶加入1100培养基体积的D-葡萄糖，培养5-6天收集上清液进行蛋白纯化， 先采用HisCapSmart6FF预装柱和30kDa浓缩管进行第一次纯化和浓缩，然后采用AKTApurifyer10蛋白层析系统进行第二次纯化，并在此步置换蛋白液溶剂为PBS； C、免疫小鼠模型构建 用PBS配置终浓度为0.4mgml的IgLON5蛋白溶液，加入等体积的完全弗氏佐剂或不完全弗氏佐剂，充分混匀；同时用PBS配置终浓度为2μgml的百日咳毒素溶液； 免疫注射： 1于day0第一次皮下注射蛋白与完全弗氏佐剂的免疫乳剂，分别注射在小鼠双肩及双下肢背部皮下，共四个点，同时第一次腹腔注射百日咳毒素；每只小鼠单次总共注射40μg蛋白于200μl乳剂中，百日咳毒素的注射剂量为每只小鼠200ng次； 2于day2第二次腹腔注射百日咳毒素，注射剂量为每只小鼠200ng次； 3于day14第二次皮下注射蛋白与不完全弗氏佐剂的免疫乳剂，注射部位及剂量同前。

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