河南中烟工业有限责任公司王秋领获国家专利权
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龙图腾网获悉河南中烟工业有限责任公司申请的专利一种饥饿微生物菌剂及其在烟叶发酵中的应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116515678B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-13发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310238691.8,技术领域涉及:C12N1/20;该发明授权一种饥饿微生物菌剂及其在烟叶发酵中的应用是由王秋领;冯颖杰;杨金初;杨宗灿;张婷婷;魏明杰;刘文召;刘强;王二彬;赵声辰设计研发完成,并于2023-03-14向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种饥饿微生物菌剂及其在烟叶发酵中的应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种饥饿微生物菌剂及其在烟叶发酵中的应用,该饥饿微生物菌剂制备方法为:将克雷伯氏菌接种到LB液体培养基中,培养得一级种子液;一级种子液与LB液体培养基混合,培养得二级种子液;二级种子液与三级种子培养基混合,培养得三级种子液;三级种子液离心去上清,沉淀加去离子水得一级饥饿种子;一级饥饿种子与烟草水提液混合得二级饥饿种子;二级饥饿种子离心,沉淀复溶,得到饥饿微生物菌剂。经过该饥饿微生物菌剂处理后,烟叶的还原糖、总糖和糖碱比明显增加,表明烟叶内在化学品质有所提升;经过饥饿微生物菌剂处理后,烟叶的香气质、香气量明显提升,杂气降低,烟气更为细腻,刺激下降,余味改善,烟叶品质改善明显。
本发明授权一种饥饿微生物菌剂及其在烟叶发酵中的应用在权利要求书中公布了:1.一种饥饿微生物菌剂,其特征在于,所述饥饿微生物菌剂通过以下方法制备而成: 1种子液制备: 将保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏编号为CGMCCNo.24327的克雷伯氏菌Klebsiellasp.HNYJ-1单菌落用接种环接种到LB液体培养基中,温度25-40℃,100-200rmin的摇床中培养6-36h,即得到一级种子液; 将一级种子液与LB液体培养基按照1:100~1:5的体积比混合,于25-40℃,100-200rmin的摇床中培养6-36h,即得到二级种子液; 将二级种子液与三级种子培养基按照体积比为1:100~1:5的比例混合,于25-40℃,100-200rmin的摇床中培养6-36h,即得到三级种子液; 其中,所述三级种子培养基通过以下方法制备:将烟草水提液与LB液体培养基按照体积比为1:1~1:10的比例混合得到; 2饥饿微生物菌剂的制备: 量取体积为V1的三级种子液离心去上清,沉淀加入80%V1体积的去离子水,放置于25-40℃温度下,10-100rmin的摇床中震荡培养1-10h,得到一级饥饿种子; 一级饥饿种子与烟草水提液按照体积比为10:1-100:1的比例混合,放置于4-30℃温度下静置6-36h,得到二级饥饿种子; 将体积为V2的二级饥饿种子离心,去除上清,沉淀用80%V2体积的去离子水复溶,放置于4℃环境中静置6-36h,得到饥饿微生物菌剂。
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