买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

龙图腾网获悉河南中烟工业有限责任公司申请的专利一种微生物胞内糖苷水解酶Eyj-2的制备及其在烟叶中的应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116478964B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-13发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310238677.8，技术领域涉及：C12N9/24；该发明授权一种微生物胞内糖苷水解酶Eyj-2的制备及其在烟叶中的应用是由王秋领;冯颖杰;杨金初;杨宗灿;张婷婷;刘文召;陈小龙;刘向真;孙九喆;赵森森设计研发完成，并于2023-03-14向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种微生物胞内糖苷水解酶Eyj-2的制备及其在烟叶中的应用在说明书摘要公布了：本发明公开了一种微生物胞内糖苷水解酶Eyj‑2的制备及其在烟叶中的应用，该微生物胞内糖苷水解酶通过以下方法制备而成：1种子液的制备：将克雷伯氏菌HNYJ‑1单菌落接种培养，得到种子液；2烟草粗糖苷的制备；3微生物产酶发酵：种子液与10％浓度的再造烟叶浓缩液混合，培养得到产酶种子；加入烟草粗糖苷，继续震荡，得发酵液；4胞内酶糖苷酶的制备：将发酵液离心，去上清，菌体沉淀破碎，离心，上清中加入饱和硫酸铵溶液，过夜，离心收集沉淀，透析，制得糖苷酶，命名为Eyj‑2,4℃存放备用。本申请经过处理后的烟叶香气物质含量整体提升明显，均为对卷烟香气有正作用的物质，可有效提升烟叶的吸食品质。

本发明授权一种微生物胞内糖苷水解酶Eyj-2的制备及其在烟叶中的应用在权利要求书中公布了：1.一种微生物胞内糖苷水解酶Eyj-2的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： 1种子液的制备： 将保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCCNo.24327的克雷伯氏菌Klebsiellasp.HNYJ-1单菌落用接种环接种到LB液体培养基中，于25-40℃，100-200rmin的摇床中培养6-36h，即得到种子液； 2烟草粗糖苷的制备： 21烟叶磨成粉末，过200目筛； 22烟末与无水乙醇按照质量比为1:2~1:10的比例混合，超声2h，超声后过滤取上清，上清在40℃温度下减压浓缩直至乙醇蒸干，加入与浓缩前乙醇等体积的去离子水，得到水悬液； 23先后采用石油醚、二氯甲烷和正丁醇进行三轮萃取，每轮萃取重复三次，分离有机相进行浓缩，去除溶剂，加入与原烟末等质量的去离子水溶解，得到烟草粗糖苷； 3微生物产酶发酵： 种子液与10%浓度的再造烟叶浓缩液按照0.5%-10%：1的体积比混合，先在25-40℃条件下，100-300rmin培养12-72h，得到产酶种子； 在无菌环境下加入提前灭菌的烟草粗糖苷，按照每毫升种子加入0.1mL粗糖苷的添加量，将其继续放置于25-40℃条件下，100-300rmin继续震荡12-72h，得到发酵液； 4胞内酶糖苷酶的制备： 将步骤3的发酵液在10000rmin，4℃条件下低温离心20min，去除上清，菌体沉淀利用超高压细胞破碎仪在1000Pa破碎2-3次，然后在4℃下10000离心20min，上清中加入2倍体积的饱和硫酸铵溶液，沉淀过夜后，10000rpm离心20min收集沉淀，10mm的pH7.3的PBS缓冲液透析3次，制得微生物胞内糖苷水解酶，命名为Eyj-2,4℃存放备用。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术，可联系本专利的申请人或专利权人河南中烟工业有限责任公司，其通讯地址为：450000 河南省郑州市郑东新区榆林南路16号；或者联系龙图腾网官方客服，联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

以上内容由龙图腾AI智能生成。