中国科学院遗传与发育生物学研究所王海涛获国家专利权
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龙图腾网获悉中国科学院遗传与发育生物学研究所申请的专利一种绵羊DQA基因1号外显子的扩增引物对、sgRNA及应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116121240B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-10发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211209223.X，技术领域涉及：C12N15/11；该发明授权一种绵羊DQA基因1号外显子的扩增引物对、sgRNA及应用是由王海涛;陈燕;许桥;刘秋月;马润林设计研发完成，并于2022-09-30向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种绵羊DQA基因1号外显子的扩增引物对、sgRNA及应用在说明书摘要公布了：本发明属于基因编辑技术领域，具体涉及一种绵羊DQA基因1号外显子的扩增引物对、sgRNA及应用。本发明提供了一种扩增绵羊DQA基因1号外显子的引物对，通过扩增引物及PCR扩增获得该区段序列，经测序无误后，根据该序列设计两条sgRNA。在本发明实施例中，利用上述设计的两条sgRNA，基于CRISPRCas9体系，对1号外显子区域进行基因编辑，筛选获得40个单克隆细胞株，测序后，发生基因编辑阳性克隆为26个，阳性率为65％，在基因组两套染色体上等位基因均发生编辑的克隆的个数为6，双等位基因均发生编辑的概率为15％。
本发明授权一种绵羊DQA基因1号外显子的扩增引物对、sgRNA及应用在权利要求书中公布了：1.靶向绵羊基因组中DQA基因1号外显子的sgRNA在制备对绵羊基因组中DQA基因1号外显子区进行基因编辑的产品中的应用，其特征在于，所述基因编辑的方法包括CRISPRCas9； 所述基因编辑的方法，包括：1分别对DQAsg1-F和DQAsg1-R、DQAsg2-F和DQAsg2-R进行退火，得到DQAsg1和DQAsg2，酶切后连接pX330载体，构建得到重组载体pX330DQAsg1和pX330DQAsg2；所述DQAsg1-F的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示，所述DQAsg1-R的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示，所述DQAsg2-F的核苷酸序列如SEQIDNO.5所示，所述DQAsg2-R的核苷酸序列如SEQIDNO.6所示； 2将所述重组载体pX330DQAsg1和pX330DQAsg2与g418抗性载体pl452共转染绵羊体细胞，经培养和g418抗性筛选后，得基因编辑细胞。
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