陕西科技大学刘江花获国家专利权
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龙图腾网获悉陕西科技大学申请的专利一种CRISPR/Cas调控的DNA银纳米簇传感器及其检测肉类掺假的方法和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115786466B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-10发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210797354.8,技术领域涉及:C12Q1/6844;该发明授权一种CRISPR/Cas调控的DNA银纳米簇传感器及其检测肉类掺假的方法和应用是由刘江花;陈嘉蕙;李国梁;吴永宁;李琳设计研发完成,并于2022-07-08向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种CRISPR/Cas调控的DNA银纳米簇传感器及其检测肉类掺假的方法和应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种CRISPRCas调控的DNA银纳米簇传感器及其检测肉类掺假的方法和应用,属于食品安全检测技术领域。该DNA模板化银纳米簇传感器引入了新型无标签荧光探针DNA‑AgNCs作为CRISPRCas12a的底物,在CRISPRCas12a‑crRNA复合体特异性识别目标核酸后,经反式剪切活性被激活,DNA模板被剪切,导致显著的荧光信号降低。通过DNA模板化银纳米簇传感器检测肉类掺假,能够将掺假的浓度巧妙转化为可定量的荧光信号输出,实现对掺假物质的定量检测,灵敏度和特异性强,能够为肉类掺假提供一个通用的、灵敏的检测方法。
本发明授权一种CRISPR/Cas调控的DNA银纳米簇传感器及其检测肉类掺假的方法和应用在权利要求书中公布了:1.一种检测羊肉掺假鸭肉的CRISPRCas调控的DNA银纳米簇传感器,其特征在于,包括CRISPRCas体系和DNA模板化银纳米簇,CRISPRCas体系由Cas12a蛋白、crRNA、RNA酶抑制剂、缓冲液以及扩增后的鸭肉样品DNA构成;DNA模板化银纳米簇由含银离子的溶液、NaBH4和DNA模板合成得到; 其中,crRNA的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.7所示;所述扩增为环介导等温扩增,扩增所用引物包括鸭肉-FIP引物、鸭肉-BIP引物、鸭肉-F3引物、鸭肉-B3引物、鸭肉-LF引物和鸭肉-LB引物;所述鸭肉-F3引物的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示,鸭肉-B3引物的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.2所示,鸭肉-FIP引物的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.3所示,鸭肉-BIP引物的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.4所示,鸭肉-LF引物的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.5所示,鸭肉-LB引物的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.6所示;鸭肉样品DNA的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.8所示;所述含银离子的溶液为AgNO3;DNA模板的序列如SEQ.ID.NO.9、SEQ.ID.NO.10、SEQ.ID.NO.11、SEQ.ID.NO.12、SEQ.ID.NO.13或SEQ.ID.NO.14所示;DNA模板的浓度为1、10、25、50、75或100μM;DNA模板、AgNO3和NaBH4的摩尔比为1:6~40:6~40。
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