崖州湾国家实验室唐克轩获国家专利权
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龙图腾网获悉崖州湾国家实验室申请的专利一种适用于大豆不同组织原生质体的制备与转化方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN121362723B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-03发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202511948586.9,技术领域涉及:C12N5/04;该发明授权一种适用于大豆不同组织原生质体的制备与转化方法是由唐克轩;沈润东;庞永珍设计研发完成,并于2025-12-23向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种适用于大豆不同组织原生质体的制备与转化方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种适用于大豆不同组织原生质体的制备与转化方法,属于生物技术领域。所述方法包括:取10‑12天土培黄化大豆苗的叶片、茎部或根部组织,切碎后,在混合酶解液中避光酶解,过滤、离心后收集沉淀细胞,重悬所述沉淀细胞,得到原生质体悬浮液;将所述原生质体悬浮液与质粒混合均匀,并加入50%PEG转化液在室温条件下转化15min。该方法通过优化酶解体系以及PEG转化液关键参数,获得一种适用于大豆多组织、多基因型的原生质体制备与转化方法,解决现有技术中大豆原生质体制备和转化过程中所存在的受材料限制、酶解效率低、转化效率差的问题。
本发明授权一种适用于大豆不同组织原生质体的制备与转化方法在权利要求书中公布了:1.一种适用于大豆不同组织原生质体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤: 取黄化大豆苗的叶片、茎部或根部组织,切碎后,在混合酶解液中避光酶解,过滤、离心后收集沉淀细胞,重悬所述沉淀细胞,得到原生质体悬浮液;其中,所述混合酶解液的组分为:2%纤维素酶、0.1%果胶酶、1%离析酶、0.6M甘露醇、10mMMES、0.1%BSA和3.4mMCaCl2; 所述酶解的条件为:先于室温60rmin的条件下酶解3-4小时,之后再于90rmin的条件下酶解5min; 所述组织与所述混合酶解液的质量体积比为0.1-0.4g:5mL; 所述过滤、离心的条件为:用70µm的滤网过滤酶解液后,将滤液再于150g离心2分钟,弃去上清液得到所述沉淀细胞。
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