国科大杭州高等研究院汪胜获国家专利权
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龙图腾网获悉国科大杭州高等研究院申请的专利一种G蛋白偶联受体的热稳定性突变位点筛选方法及其用途获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120948816B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-03发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202511493999.2,技术领域涉及:G01N33/68;该发明授权一种G蛋白偶联受体的热稳定性突变位点筛选方法及其用途是由汪胜;樊鲁玉;金家宇;王雨朦设计研发完成,并于2025-10-20向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种G蛋白偶联受体的热稳定性突变位点筛选方法及其用途在说明书摘要公布了:本发明涉及生物学和生物技术领域,一种G蛋白偶联受体的热稳定性突变位点筛选方法及其用途,包括:S1、将野生型G蛋白偶联受体中的第三胞内环区段替换为kappa阿片类受体的第三胞内环序列;在野生型G蛋白偶联受体上标记SmBiT肽段标签;S2、按照待测G蛋白偶联受体突变体中突变位点,对野生型G蛋白偶联受体进行突变;S3、将步骤S2改造后的G蛋白偶联受体在不同的温度下孵育,得到不同温度处理的改造后的G蛋白偶联受体样品;S4、不同温度处理的改造后的G蛋白偶联受体样品与纳米抗体‑LgBiT复合物混合孵育,然后加入荧光素酶作用底物,检测;本发明方法筛选效率高,成本低,时间短。
本发明授权一种G蛋白偶联受体的热稳定性突变位点筛选方法及其用途在权利要求书中公布了:1.一种G蛋白偶联受体的热稳定性突变位点筛选方法,其特征在于,包括: S1、将野生型G蛋白偶联受体中的第三胞内环区段全部替换为kappa阿片类受体的第三胞内环序列;在所述野生型G蛋白偶联受体上标记SmBiT肽段标签;将所述野生型G蛋白偶联受体中的第三胞内环区段的上游的TM5区段中靠近第三胞内环区段N端的5~12个氨基酸被kappa阿片类受体的第三胞内环序列替换,以及下游的TM6区段靠近第三胞内环区段C端的5~25个氨基酸被kappa阿片类受体的第三胞内环序列替换; S2、按照待测G蛋白偶联受体突变体中突变位点,对步骤S1中所述野生型G蛋白偶联受体进行突变; S3、将步骤S2处理后,得到改造后的G蛋白偶联受体突变体;将改造后的G蛋白偶联受体突变体在不同的温度下孵育,得到不同温度处理的改造后的G蛋白偶联受体样品; S4、不同温度处理的改造后的G蛋白偶联受体样品与纳米抗体和LgBiT复合物混合孵育,然后加入荧光素酶作用底物,检测; 所述G蛋白偶联受体为多巴胺D2受体、血清素2A受体、腺苷A2A受体或GPR151。
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