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龙图腾网获悉中山大学附属第一医院申请的专利一种人源化瘢痕疙瘩小鼠模型的构建方法及其应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119257071B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-03发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411404153.2，技术领域涉及：A01K67/0271；该发明授权一种人源化瘢痕疙瘩小鼠模型的构建方法及其应用是由刘丽娟;祁少海;赵广银设计研发完成，并于2024-10-09向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种人源化瘢痕疙瘩小鼠模型的构建方法及其应用在说明书摘要公布了：本发明提供一种人源化瘢痕疙瘩小鼠模型的构建方法，包括以下步骤：BAC质粒构建与制备；实验小鼠超数排卵和受精卵收集；受精卵原核显微注射；注射后胚胎移植；基因型鉴定；繁育与遗传分析；用免疫组化及免疫荧光验证人源化免疫系统构建结果。本发明首次将经sCD27处理的外周血单个核细胞与瘢痕疙瘩周围皮肤同源细胞与组织移植入CD70基因过表达的NSG‑MHC‑DKO免疫缺失小鼠体内，避免免疫细胞和组织不同源可能发生的HLA排斥，最大程度地还原瘢痕疙瘩内部微环境及其与免疫系统的相互作用，可实现体外研究免疫因素对瘢痕疙瘩发生发展的影响。本发明首次发现并验证了CD27‑CD70轴的激活可促进瘢痕疙瘩的发生发展，为抗瘢痕药物的研发特别是免疫治疗提供适合的动物模型。

本发明授权一种人源化瘢痕疙瘩小鼠模型的构建方法及其应用在权利要求书中公布了：1.一种人源化瘢痕疙瘩小鼠模型的构建方法，其特征在于：包括以下步骤： 步骤一、BAC质粒载体选择plndigoBAC536，将loxp位点插入至hCD70基因启动子区域，用DNA连接酶将质粒载体，含有loxp位点的目的基因连接起来； 步骤二、利用拉针仪制备注射针和固定针，固定针口为外径100-120um，内径20-30um，最后弯针角度15°备用，用注射针将稀释的BAC质粒注射到胚胎的雄原核内，看到原核内部膨大为止，最后转移至M16培养液中培养； 步骤三、胚胎移植，用1mL注射器针头在壶腹部前侧刺一切口，之后将胚胎经此切口吹入输卵管壶腹部； 步骤四、确定过表达小鼠的基因型； 步骤五、使用绝对定量PCR法对各品系F2代小鼠的拷贝数进行检测，获得转基因小鼠CD70的拷贝数浓度；相对定量PCR法检测CD70基因表达量，WesternBlot检测CD70蛋白表达； 步骤六、取CD70过表达的转基因NSG-MHC-DKO小鼠，麻醉下在其背部左右侧分别移植人瘢痕疙瘩周围皮肤组织； 步骤七、收集瘢痕疙瘩患者外周血，淋巴细胞分离液分离同源外周血单个核细胞后加入可溶性CD27，CD27处理后PBMC通过鼠尾静脉注射入小鼠体内； 步骤八、PBMC在体内增值的大部分为T细胞，均为CD3+阳性，单个核细胞均为CD45+阳性；输注细胞2周后规律通过流式细胞术观察小鼠外周血CD3+CD45+双染细胞比例，当CD3+CD45+双染细胞比例≥15%时认为人源化免疫重建成功。

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