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上海交通大学董涛获国家专利权

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龙图腾网获悉上海交通大学申请的专利铜绿假单胞菌工程菌DUEC的构建方法及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115992162B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-03发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211049053.3,技术领域涉及:C12N15/78;该发明授权铜绿假单胞菌工程菌DUEC的构建方法及应用是由董涛;吴丽丽设计研发完成,并于2022-08-30向国家知识产权局提交的专利申请。

铜绿假单胞菌工程菌DUEC的构建方法及应用在说明书摘要公布了:本发明涉及一种铜绿假单胞菌工程菌DUEC的构建方法及应用。本发明DUEC工程菌株构建方法为:感应激酶编码基因retS和鞘蛋白编码基因tssB2、tssB3敲除,H1‑T6SS分泌效应蛋白Tse1‑Tse4、Tse6‑Tse8催化位点突变,Tse5编码基因敲除。DUEC工程菌株既能够组成性的表达和组装H1‑T6SS,还能够响应相邻姐妹细胞来源的T6SS攻击,在被攻击的位置组装H1‑T6SS。本发明通过基因敲除或催化位点突变等方法构建了一系列效应蛋白组合失活突变株。显微镜观察和统计分析结果显示没有任何一个单独的效应蛋白是T6SS对决和组装必需的。通过细菌竞争实验,验证了所有效应蛋白失活的突变株8effc丧失了对T6SS+霍乱弧菌和T6SS+达卡气单胞菌的杀菌活性,但是8effc能够响应T6SS物理攻击,在混合群落中将Tse6N‑Cre特异性地传递到T6SS+霍乱弧菌中。

本发明授权铜绿假单胞菌工程菌DUEC的构建方法及应用在权利要求书中公布了:1.一种铜绿假单胞菌工程菌DUEC的构建方法,其特征在于,所述构建方法包括如下步骤: 在铜绿假单胞菌PAO1野生型中,首先敲除感应激酶编码基因retS和鞘蛋白编码基因tssB2、tssB3,随后对H1-T6SS分泌效应蛋白Tse1-Tse4、Tse6-Tse8进行催化位点突变,Tse5编码基因进行敲除,即得所述铜绿假单胞菌工程菌DUEC; 所述突变具体为:Tse1C30A:C30突变为丙氨酸;Tse2VK-AA:V109和K110突变为丙氨酸;Tse3E250Q:E250突变为谷氨酰胺;Tse4G176V:G176突变为缬氨酸;Tse6D396A:D396突变为丙氨酸;Tse7HH-AA:H229和H230突变为丙氨酸;Tse8S186A:S186突变为丙氨酸。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人上海交通大学,其通讯地址为:200240 上海市闵行区东川路800号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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