肽源(广州)生物科技有限公司张齐获国家专利权
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龙图腾网获悉肽源(广州)生物科技有限公司申请的专利一种重组纤连蛋白及其制备方法与应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN121045365B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-27发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202511595631.7,技术领域涉及:C07K14/78;该发明授权一种重组纤连蛋白及其制备方法与应用是由张齐;肖巧学;吴旭伟;卢远旭设计研发完成,并于2025-11-04向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种重组纤连蛋白及其制备方法与应用在说明书摘要公布了:本发明属于生物技术领域,具体涉及一种重组纤连蛋白及其制备方法与应用。本发明提供的重组纤连蛋白的制备方法包括:构建含优化核苷酸序列SEQIDNO.2的重组质粒,转化大肠杆菌诱导表达;菌体经缓冲液重悬、高压均质后,添加碱性蛋白酶一步酶解,灭活后离心取沉淀,经NaCl洗涤和醋酸溶解,得到重组纤连蛋白原液,重组纤连蛋白rhFNb氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。本发明提供的制备方法无需层析纯化,15分钟内即可完成所述重组纤连蛋白的精制,在保证产物纯度≥95%、黏附活性高的同时,有效缩短了生产周期。
本发明授权一种重组纤连蛋白及其制备方法与应用在权利要求书中公布了:1.一种重组纤连蛋白的快速制备方法,其特征在于,具体包括以下步骤: S1、化学合成SEQIDNO.2所示的序列,通过酶切将SEQIDNO.2所述的序列插入载体中,得到重组载体; S2、将步骤S1所述重组载体转化至大肠杆菌中,诱导表达; S3、收集步骤S2中诱导表达完成后的菌体,加入缓冲液混匀,得到菌悬液,然后均质、孵育,得到孵育产物;所述缓冲液为磷酸缓冲液或Tris缓冲液; S4、将碱性蛋白酶加入步骤S3所述孵育产物中,混匀,反应,得反应液,然后加酸调节pH至2.05.0,终止反应;所述碱性蛋白酶添加的比例为每克起始菌体湿重添加5~10U碱性蛋白酶;所述反应的温度为15~20℃,反应时长为10~20min; S5、将步骤S4终止反应后的产物离心,离心条件为7000~9000g,5~15min,取沉淀,洗涤,溶解,即得。
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