浙江中烟工业有限责任公司李秋剑获国家专利权
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龙图腾网获悉浙江中烟工业有限责任公司申请的专利一种提高烟草抗黑胫病能力的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119366384B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-27发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411518650.5,技术领域涉及:A01G13/00;该发明授权一种提高烟草抗黑胫病能力的方法是由李秋剑;史久长;王卫民;赵炯平;张力;郭进;芦伟龙;李文奎;潘飞龙设计研发完成,并于2024-10-29向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种提高烟草抗黑胫病能力的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种提高烟草抗黑胫病能力的方法,包括:S1、配置不同浓度的硼酸,分别加入每份用100ml超纯水溶解的土壤中;S2、将上述土壤放置于阴凉处,得到不同外源硼质量的土壤;S3、采用土培法育苗,S4、烟草幼苗移至土培盒中生长,S5、将同一半径等量的菌饼;体外台盼兰染色中,取相同部位烟草叶片放置在塑料盘中,在叶片下垫湿润的纱布以保湿,每个盘中放置3片叶子,在叶子上接种活化好的烟草疫霉菌饼,每片叶片上避开主脉接种两块烟草疫霉菌饼,用保鲜膜密封后放置于28℃培养箱中;S6、在病菌侵染处理3d后,取第三片真叶分别用以测定病斑面积、光合参数以及丙二醛MDA含量;S7、透射电镜及台盼蓝染色观察。
本发明授权一种提高烟草抗黑胫病能力的方法在权利要求书中公布了:1.一种提高烟草抗黑胫病能力的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤: S1、以硼酸作为硼源,称取12kg土壤并分为6等份,每份2kg;再分别称取11.27、22.55、33.82、56.36、112.72mg的硼酸,分别加入每份用100ml超纯水溶解的土壤中,搅拌均匀; S2、将上述土壤放置于阴凉处,每日搅拌松土一次,七天后得到外源硼质量分别为0、1、2、3、5、10mgkg的土壤; S3、采用土培法育苗,试验前期以育苗盘和工字格海绵为介质,将烟草种子用10%过氧化氢消毒后,再用蒸馏水清洗干净,室温避光条件下浸泡1d后均匀地点在海绵中,待烟草种子露白发芽后,选取长势一致的幼苗,用镊子移至蛭石中生长; S4、烟草幼苗长至四叶期时从海绵中移至土培盒中生长,每个土培盒含有土壤200g,烟苗在土培盒中长到六叶一心时进行处理; S5、将同一半径等量的菌饼,避开主脉放置于相同部位烟草叶片上;体外台盼兰染色中,取相同部位烟草叶片放置在塑料盘中,在叶片下垫湿润的纱布以保湿,每个盘中放置3片叶子,在叶子上接种活化好的烟草疫霉菌饼,每片叶片上避开主脉接种两块烟草疫霉菌饼,用保鲜膜密封后放置于28℃培养箱中; 每个上述处理方式设置3次重复,每个重复4株烟苗; S6、在病菌侵染处理3d后,取第三片真叶分别用以测定病斑面积、光合参数以及丙二醛MDA含量; S7、透射电镜及台盼蓝染色观察 收集不同外源硼处理未接菌烟草幼苗与接菌3d后烟草幼苗上部叶,剪成1mm×1mm若干小块,将切割好的小组织块转移至装有2.5%戊二醛的EP管内固定,并用真空泵抽气直至沉底,室温放置2h后4℃固定保存及运输; 再用0.1M磷酸缓冲液PB、pH为7.4,漂洗3次,每次15min,后移至1%锇酸避光室温固定7h。再依次入30%-50%-70%-80%-95%-100%酒精上行脱水,每次1h; 随后使用丙酮脱水,Epon812渗透包埋,60℃下聚合24h后,在超薄切片机上切片,醋酸双氧铀和柠檬酸铅双重染色后,于透射电镜下观察并照相。
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