广西壮族自治区药用植物园秦双双获国家专利权
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龙图腾网获悉广西壮族自治区药用植物园申请的专利鸡血藤瞬时转化方法及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116004709B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-27发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210906155.6,技术领域涉及:C12N15/84;该发明授权鸡血藤瞬时转化方法及应用是由秦双双;林泉;谢月英;韦桂丽;缪剑华设计研发完成,并于2022-07-29向国家知识产权局提交的专利申请。
本鸡血藤瞬时转化方法及应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种鸡血藤瞬时转化方法,其包括以下步骤:1构建表达载体质粒;2将表达载体质粒转入根癌农杆菌感受态细胞中,并利用菌液侵染鸡血藤盛花期花瓣;3将浸染后的鸡血藤花进行遮光处理,过夜培养12‑24h,即完成鸡血藤的瞬时转化。本发明还提供了鸡血藤瞬时转化方法在研究目的基因调控鸡血藤活性成分合成中的应用。本发明建立了适用于鸡血藤的农杆菌注射渗透介导的瞬时表达体系,可快速、便捷、高效地获得瞬时转化材料,特别有助于研究鸡血藤活性成分合成相关基因。
本发明授权鸡血藤瞬时转化方法及应用在权利要求书中公布了:1.鸡血藤瞬时转化方法,其特征在于,包括以下步骤: 1构建表达载体质粒; 所述表达载体为过表达载体,将鸡血藤基因SsMYB106与质粒pBI121载体连接,构建过表达载体质粒pBI121-SsMYB106;鸡血藤基因SsMYB106如SEQIDNO.1所示; 过表达载体质粒携带有CaMV35S启动子、Kanamycin载体抗性及报告基因; 所述报告基因为β-Glucuronidase、荧光素酶、荧光蛋白中的任意一种; 2将表达载体质粒转入根癌农杆菌感受态细胞中,并利用菌液侵染鸡血藤盛花期花瓣; 通过液氮冻融法将过表达载体质粒转入根癌农杆菌GV3101感受态细胞,经菌落PCR鉴定无误,侵染鸡血藤盛花期花瓣; 用无菌注射器在花瓣背面轻轻摩擦出细微伤口,使用无针头的无菌注射器将菌液于伤口处缓慢注入菌液,在花瓣两边分别进行注射,使注射后的花瓣呈半透明状; 3将浸染后的鸡血藤花进行遮光处理,过夜培养12-24h,即完成鸡血藤的瞬时转化。
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