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龙图腾网获悉合肥工业大学申请的专利一种凝血酶检测用免泵微流控芯片的制备及应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN114942332B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-27发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210557831.3，技术领域涉及：G01N33/573；该发明授权一种凝血酶检测用免泵微流控芯片的制备及应用是由高荣科;杨玉杰;卓莹;于连栋;陆洋;贾华坤;陈孝喆;夏豪杰设计研发完成，并于2022-05-19向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种凝血酶检测用免泵微流控芯片的制备及应用在说明书摘要公布了：本发明公开了一种免泵微流控芯片的制备方法，包括以下步骤；步骤S1，镀金基底的表面修饰；步骤S2，免泵微流控芯片的制作；步骤S3，制作免泵微流控芯片内部驱动液体流动的指压泵；步骤S4，镀金基底的嵌入与芯片的封接。本发明还提供了前述免泵微流控芯片制备方法制备的免泵微流控芯片在凝血酶检测中的应用的技术方案。本发明设计的免泵微流控芯片制作成本低，无需专业人士操作，检测操作过程简单。实现了灵敏度高、检测时间短、检测下限低。

本发明授权一种凝血酶检测用免泵微流控芯片的制备及应用在权利要求书中公布了：1.一种免泵微流控芯片在凝血酶检测中的应用，其特征在于， 采用拉曼检测方法进行检测，具体步骤包括： 使用移液枪首先从进液口添加凝血酶，接着再同时通入作为凝血酶检测探针的修饰了适体TBA29和拉曼报告分子MGITC的金纳米颗粒，在蛇行通道的作用下，凝血酶抗原与其检测探针充分反应，从而在孵育了TBA15适体的镀金基底上形成了三明治结构的免疫复合物； 试剂通入完毕后将芯片静置，待其反应一段时间后，从进液口通入PBS缓冲液对芯片进行多次冲洗，用于洗去未与镀金基底上TBA15适体结合的凝血酶和凝血酶检测探针； 最后遵循控制变量的原则，对镀金基底上形成的免疫复合物进行了拉曼检测； 所述的凝血酶检测探针的制备方法为：首先将1μL0.5M的三2-羧乙基膦TCEP与50μL100μM的凝血酶的一段DNA适体TBA29混合并在室温下孵育6小时从而生成游离的巯基； 接着在1mL的金纳米颗粒溶液中加入100μL的1μMTBA29适体溶液，随后加入2.5M的NaCl溶液和0.5M的PBS缓冲液，使二者的最终浓度分别为0.1M和10mM； 经计算，所需添加的NaCl溶液和PBS缓冲液的体积分别是46.8μL和23.4μL； 将该溶液在50°C的干式恒温器内孵育48小时继续老化，选择在48小时内平均分六次在TBA29适体溶液中加入NaCl溶液，即每次添加7.8μL； 在48小时的孵育结束之前两小时加入4μL10-5M的拉曼报告分子MGITC； 最后将该混合溶液置于差速离心机中以5500rpm的速度离心15分钟，并用移液枪移除上清液以去除未与金纳米颗粒结合的游离态适体及MGITC，沉淀物悬浮在PBS缓冲液中待用， 其中， TBA29DNA适体序列：5’-dithiol-TTTTTTTTTTAGTCCGTGGTAGGGCAGGTTGGGGTGACT-3’； 其中所述，免泵微流控芯片的制备方法，包括以下步骤； 步骤S1，镀金基底的表面修饰； 将亲水处理后的镀金基底浸泡在1mL70nM的凝血酶的一段DNA适体TBA15溶液中，用于将TBA15适体修饰在其上； 接着将其放入真空泵中继续抽真空20分钟，以去除适体溶液中的气体； 处理过后，将浸泡了镀金基底的适体溶液放入蜂窝振荡器中振荡24小时； 振荡结束后，用镊子把处理后的镀金基底从适体溶液中取出并将它们放入置有1mL2mM的6-MCH溶液的离心管中浸泡2小时； 浸泡结束后，将它们分别用去离子水和酒精清洗多次，待其自然风干后再使用； TBA15DNA适体序列：5’-dithiol-TTTTTTTTTTGGTTGGTGTGGTTGG-3’； 步骤S2，免泵微流控芯片的制作； 把绘制的图案打印在透明菲林片上，再利用紫外光刻机把图案固化在硅膜板上； 聚二甲基硅氧烷PDMS与固化剂混合好后倒在硅模板上固化，经倒模得到PDMS芯片； 步骤S3，制作免泵微流控芯片内部驱动液体流动的指压泵； 步骤S4，镀金基底的嵌入与芯片的封接。

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