山东省泉溪生物技术有限公司李栋获国家专利权
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龙图腾网获悉山东省泉溪生物技术有限公司申请的专利一种用于膝关节炎治疗的羊膜间充质干细胞及其制备方法与应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120866212B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-24发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202511393976.4,技术领域涉及:C12N5/0775;该发明授权一种用于膝关节炎治疗的羊膜间充质干细胞及其制备方法与应用是由李栋;戴晓宇;李树建设计研发完成,并于2025-09-28向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种用于膝关节炎治疗的羊膜间充质干细胞及其制备方法与应用在说明书摘要公布了:本发明属于生物医药技术领域,具体涉及一种用于膝关节炎治疗的羊膜间充质干细胞及其制备方法与应用。所述羊膜间充质干细胞的制备方法,具体步骤如下:1分离得到羊膜组织;2将羊膜组织消化,过滤、离心,获得细胞沉淀;3将细胞沉淀重悬,接种至培养基培养后,消化,离心,弃上清,得到P0代羊膜间充质干细胞;4将P0代羊膜间充质干细胞分种至培养基中进行传代培养,得到羊膜间充质干细胞。通过在基础培养基中添加替普瑞酮、夏佛塔苷,可以维持羊膜间充质干细胞的细胞干性,提升羊膜间充质干细胞的成骨分化能力,从而有效的治疗膝关节炎。同时该基础培养基不添加胎牛血清,提高了临床应用的安全性。
本发明授权一种用于膝关节炎治疗的羊膜间充质干细胞及其制备方法与应用在权利要求书中公布了:1.一种用于膝关节炎治疗的羊膜间充质干细胞的制备方法,其特征在于,具体步骤如下: 1取胎盘组织,分离得到羊膜组织; 2将步骤1得到的羊膜组织中加入混合酶消化液进行消化,过滤、离心,获得细胞沉淀;以终浓度计,所述混合酶消化液中各组分的浓度为:1-3UmL中性蛋白酶、0.2-0.4mgmL脱氧核糖核酸酶I、1-2mgmL胶原酶IV; 3将步骤2得到的细胞沉淀加入培养基重悬得到细胞悬液,将细胞悬液接种至培养基培养后,加入胰蛋白酶消化,然后离心,弃上清,所得沉淀物即为P0代羊膜间充质干细胞; 4将P0代羊膜间充质干细胞分种至培养基中进行传代培养,得到羊膜间充质干细胞;传代培养得到的羊膜间充质干细胞为P3-P5代羊膜间充质干细胞;所述步骤3和4中培养基包括基础培养基和添加在基础培养基中的以下成分:碱性成纤维细胞生长因子、L-谷氨酰胺、转铁蛋白、维生素C、亚硒酸钠、胰岛素、夏佛塔苷、替普瑞酮;以终浓度计,所述培养基中各组分的浓度为:碱性成纤维细胞生长因子5-18ngmL、L-谷氨酰胺1.8-2.5mgmL、转铁蛋白3-10mgmL、维生素C20-30μgmL、亚硒酸钠12-25μgmL、胰岛素10-15μgmL、夏佛塔苷15-30μgmL、替普瑞酮20-42ngmL。
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