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龙图腾网获悉浙江大学杭州国际科创中心申请的专利一种发酵生产三乙酸内酯的酵母工程菌及其应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116103175B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-24发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211693736.2，技术领域涉及：C12N1/19；该发明授权一种发酵生产三乙酸内酯的酵母工程菌及其应用是由黄磊;丰林娟;顾小松;连佳长设计研发完成，并于2022-12-26向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种发酵生产三乙酸内酯的酵母工程菌及其应用在说明书摘要公布了：本发明公开了一种发酵生产三乙酸内酯的酵母工程菌及其应用。所述工程菌以毕赤酵母GS115为出发菌株，导入2‑吡喃酮合成酶编码基因Gh2PS，同时过表达乙酰辅酶A羧化酶基因ScACC1，进一步提高Gh2PS拷贝数，得到所述毕赤酵母工程菌。本发明开发的毕赤酵母工程菌可高效生产三乙酸内酯，其摇瓶发酵产量达到2.72gL，1L发酵罐发酵最高产量达到9.72gL。本发明构建了一种发酵生产三乙酸内酯的毕赤酵母工程菌，为后续开发高效合成高价值平台化合物三乙酸内酯的毕赤酵母底盘菌株奠定了基础。

本发明授权一种发酵生产三乙酸内酯的酵母工程菌及其应用在权利要求书中公布了：1.一种发酵生产三乙酸内酯的酵母工程菌，其特征在于，以毕赤酵母作为出发菌株，通过导入基因构建获得所述酵母工程菌，导入基因为2-吡喃酮合成酶Gh2PS的编码基因和乙酰辅酶A羧化酶ScACC1的编码基因；构建时，所述导入基因通过CRISPRCas9技术整合到菌株基因组中； 所述发酵生产三乙酸内酯的酵母工程菌构建方法包括以下步骤： 1将2-吡喃酮合成酶Gh2PS的编码基因序列整合到毕赤酵母GS115-Cas9的基因组中，获得菌株GTAL-1，该步骤中使用的sgRNA序列为5’-tatctgaagtatttactggg-3’； 2将乙酰辅酶A羧化酶ScACC1的编码基因序列整合到菌株GTAL-1中，获得菌株GTAL-2，该步骤中使用的sgRNA序列为5’-gattcagtagagtcctattg-3’； 3将1个单拷贝的2-吡喃酮合成酶Gh2PS的编码基因序列整合到菌株GTAL-2中，获得菌株GTAL-3，该步骤中使用的sgRNA序列为5’-tattaaaaaagacgatcccg-3’； 4将1个单拷贝的2-吡喃酮合成酶Gh2PS的编码基因序列整合到菌株GTAL-3中，获得菌株GTAL-4，该步骤中使用的sgRNA序列为5’-agaagaaaatgcgaaacagg-3’；再将1个单拷贝的2-吡喃酮合成酶Gh2PS的编码基因序列整合到菌株GTAL-4中，获得菌株GTAL-5，该步骤中使用的sgRNA序列为5’-gtgacgaaagagatgaggtg-3’；再将1个单拷贝的2-吡喃酮合成酶Gh2PS的编码基因序列整合到菌株GTAL-5中，获得菌株GTAL-6，该步骤中使用的sgRNA序列为5’-ccgtcactatgaggacaaag-3’； 5将1个单拷贝的2-吡喃酮合成酶Gh2PS的编码基因序列整合到菌株GTAL-6中，获得菌株GTAL-7，即所述发酵生产三乙酸内酯的酵母工程菌，该步骤中使用的sgRNA序列为5’-gatcagttcattgatagaca-3’； 所述2-吡喃酮合成酶Gh2PS的编码基因序列如SEQIDNO.1所示，所述乙酰辅酶A羧化酶ScACC1的编码基因序列如SEQIDNO.2所示； 构建过程中使用的启动子为pTEF1；终止子为t0547或tAOX1。

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