江南大学徐美娟获国家专利权
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龙图腾网获悉江南大学申请的专利一种高产四氢嘧啶的重组谷氨酸棒杆菌及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115786219B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-24发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210973252.7,技术领域涉及:C12N1/21;该发明授权一种高产四氢嘧啶的重组谷氨酸棒杆菌及其应用是由徐美娟;饶志明;江安;张显;杨套伟设计研发完成,并于2022-08-15向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种高产四氢嘧啶的重组谷氨酸棒杆菌及其应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种高产四氢嘧啶的重组谷氨酸棒杆菌及其应用,属于生物工程技术领域。本发明通过过表达反馈抑制解除的天冬氨酸激酶LycS301YS301Y和天冬氨酸半醛脱氢酶Asd,可增加前体天冬氨酸半醛的供应。本发明通过在二氢吡啶二羧酸合成酶基因dapA启动子区域插入阻遏蛋白BetI结合序列,同时过表达阻遏蛋白BetI,可大大降低发酵液中副产物L‑赖氨酸的含量。本发明通过在柠檬酸合酶基因gltA启动子区域插入阻遏蛋白LmrA结合序列,同时过表达阻遏蛋白LmrA,解决了菌体生长和发酵产酸之间的不平衡,可增加前体草酰乙酸和乙酰CoA供应,使四氢嘧啶的产量得到大幅提高,产量高达45.5gL,产率高达0.25gg葡萄糖。
本发明授权一种高产四氢嘧啶的重组谷氨酸棒杆菌及其应用在权利要求书中公布了:1.一种重组谷氨酸棒杆菌,其特征在于,在宿主谷氨酸棒杆菌CorynebacteriumglutamicumK02的基因组上的二氢吡啶二羧酸合成酶基因dapA启动子下游插入阻遏蛋白BetI结合序列,并在柠檬酸合酶基因gltA启动子下游插入阻遏蛋白LmrA结合序列;同时过表达了施氏假单胞菌来源的四氢嘧啶合成基因簇ectBAC、偶联了阻遏蛋白LmrA的5’UTR序列的阻遏蛋白基因lmrA、谷氨酸棒杆菌来源的反馈抑制解除的天冬氨酸激酶基因lysCS301Y,大肠杆菌来源的天冬氨酸半醛脱氢酶基因asd以及偶联了阻遏蛋白BetI的5’UTR序列的阻遏蛋白基因betI; 所述阻遏蛋白BetI结合序列的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示,所述阻遏蛋白LmrA结合序列的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示; 阻遏蛋白BetI的5’UTR序列的核苷酸序列如SEQIDNO.12、13任一所示,所述阻遏蛋白基因lmrA的5’UTR序列的核苷酸序列如SEQIDNO.19~21任一所示;所述四氢嘧啶合成基因簇ectBAC的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示,所述阻遏蛋白基因lmrA的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示,所述阻遏蛋白基因betI的核苷酸序列如SEQIDNO.5所示,所述天冬氨酸激酶基因lysCS301Y基因的核苷酸序列如SEQIDNO.6所示,所述天冬氨酸半醛脱氢酶基因asd的核苷酸序列如SEQIDNO.7所示。
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