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肽源(广州)生物科技有限公司色依德·斯马依获国家专利权

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龙图腾网获悉肽源(广州)生物科技有限公司申请的专利一种基于荧光示踪与非色谱层析技术的胶原蛋白纯化方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120988106B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-17发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202511517227.8,技术领域涉及:C07K14/78;该发明授权一种基于荧光示踪与非色谱层析技术的胶原蛋白纯化方法是由色依德·斯马依;卢远旭;肖巧学设计研发完成,并于2025-10-23向国家知识产权局提交的专利申请。

一种基于荧光示踪与非色谱层析技术的胶原蛋白纯化方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种基于荧光示踪与非色谱层析技术的胶原蛋白纯化方法,基于III型胶原蛋白功能域的分析,利用化学固相合成获得小分子活性多肽,分别在体内外对小分子活性多肽进行精准筛选,确定III型胶原蛋白中具有促细胞迁移、增殖和伤口修复的活性位点。本发明,通过采用eGFP‑SUMO和ELPs双标签融合策略,实现了多肽5‑ELPs的异源表达,并完成了无需色谱层析技术的纯化,相比于传统镍柱纯化工艺,其不受高成本的层析系统和填料的限制,可明显缩短纯化时间和成本,本发明涉及生物医药技术领域。eGFP蛋白的引入,实现了重组蛋白表达和纯化的可视化,便于后续生产过程的蛋白表达纯化的示踪和监测,eGFP的引入使多肽5‑ELPs的发酵和纯化全周期生产可视化。

本发明授权一种基于荧光示踪与非色谱层析技术的胶原蛋白纯化方法在权利要求书中公布了:1.一种基于荧光示踪与非色谱层析技术的胶原蛋白纯化方法,其特征在于:具体包括以下步骤: S1、通过生物信息学方法对III型胶原蛋白序列进行分析,截选五个具有潜在生物活性的多肽片段,然后通过体外化学合成法制备候选多肽; S2、对截选出的具有潜在生物活性的多肽片段,通过细胞增殖、细胞迁移、细胞粘附实验以及动物实验评估其生物学活性,确定构建融合蛋白的多肽片段,筛选出最优多肽片段,即多肽5,所述多肽5的氨基酸序列如SEQIDNO 5所示; S3、通过无缝克隆技术,分别扩增eGFP、SUMO、多肽5‑ELPs和载体pET3c并将其连接,获得原核表达载体pET3c‑GS‑多肽5‑ELPs; S4、融合蛋白GS‑多肽5‑ELPs的诱导表达,将重组质粒pET3c‑GS‑多肽5‑ELPs转入到表达菌株E.coli BL21DE3 pLysS,经过IPTG诱导表达后破碎并收集含GS‑多肽5‑ELPs的上清,进行SDS‑PAGE和WB验证; S5、获得含GS‑多肽5‑ELPs上清溶液,基于GS‑多肽5‑ELPs中 ELPs标签的可逆相变特性,采用温度调控介导的ITC方式进行蛋白纯化,结合 SDS‑PAGE电泳分析纯化效果; S6、对相变纯化获得的蛋白进行细胞增殖、细胞迁移实验以及稳定性实验。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人肽源(广州)生物科技有限公司,其通讯地址为:511447 广东省广州市番禺区石楼镇嵩山路64号(E栋厂房)2楼201号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

以上内容由龙图腾AI智能生成。

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