中国计量科学研究院隋志伟获国家专利权
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龙图腾网获悉中国计量科学研究院申请的专利一种嗜热链球菌的寡核苷酸探针及其制备方法和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120193105B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-17发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510454809.X,技术领域涉及:C12Q1/689;该发明授权一种嗜热链球菌的寡核苷酸探针及其制备方法和应用是由隋志伟;刘思渊;蔡小雨;王蒙;王梓权设计研发完成,并于2025-04-11向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种嗜热链球菌的寡核苷酸探针及其制备方法和应用在说明书摘要公布了:本申请涉及生物检测技术领域,尤其涉及一种嗜热链球菌的寡核苷酸探针及其制备方法和应用;所述寡核苷酸探针具有如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列。基于16SrRNA基因的V1区兼具保守性与特异性,以嗜热链球菌的16srRNA序列的V1区目的基因,设计出多个具有20bp长度的寡核苷酸探针,可以有效地降低寡核苷酸探针的非特异性,然后将这些寡核苷酸探针在核苷酸序列文库进行检索分析,可以筛选出符合荧光原位杂交的要求,最后使用多个菌种将寡核苷酸探针进行实际检测,可以筛选出较高特异性的寡核苷酸探针,可以与待测样本的嗜热链球菌相结合,从而可以提高在荧光原位杂交以及流式分析技术中寡核苷酸探针的准确性。
本发明授权一种嗜热链球菌的寡核苷酸探针及其制备方法和应用在权利要求书中公布了:1.一种定量酸奶中嗜热链球菌活菌数的方法,其特征在于,所述方法包括: 将待检测样本进行重悬处理,得到待测菌重悬液; 将叠氮溴化丙锭溶液和所述待测菌重悬液进行混合,得到混合溶液; 将所述混合溶液依次进行光暗交替,使得所述混合溶液的嗜热链球菌死菌与叠氮溴化丙锭结合形成沉淀,得到除杂混合溶液; 将所述除杂混合溶液进行样品固定和离心重悬,得到菌体重悬液;其中,所述样品固定所使用的试剂是质量浓度为75%的酒精; 将杂交缓冲液、所述菌体重悬液和寡核苷酸探针进行孵育,得到杂交产物; 将所述杂交产物进行多次离心和重悬,得到待测杂交样品; 将所述待测杂交样品进行流式分析,确定待测杂交样品的种类和数量; 所述寡核苷酸探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示; 所述杂交缓冲液的组分包括:氯化钠、三羟甲基氨基甲烷盐酸盐、十二烷基硫酸钠和甲酰胺,所述氯化钠的摩尔浓度为0.9molL;所述三羟甲基氨基甲烷盐酸盐的摩尔浓度为20mmolL;所述十二烷基硫酸钠的质量m2和所述杂交缓冲液的体积V3满足关系式:m2:V3=0.1:100,若m2的单位为g,则V3的单位为L;所述甲酰胺的质量m3和所述杂交缓冲液的体积V4满足关系式:m3:V4=25:100。
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