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龙图腾网获悉广东一方制药有限公司申请的专利蚂蟥药材、标准汤剂、中药配方颗粒及中成药的鉴别方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN118533979B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-17发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310150409.0，技术领域涉及：G01N30/02；该发明授权蚂蟥药材、标准汤剂、中药配方颗粒及中成药的鉴别方法是由范耀耀;胡绮萍;刘晓琳;杨丽;邓立萍;吴文平;何嘉莹;庞伟;罗宇琴;李国卫;孙冬梅;沈斌斌设计研发完成，并于2023-02-21向国家知识产权局提交的专利申请。

本蚂蟥药材、标准汤剂、中药配方颗粒及中成药的鉴别方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种蚂蟥药材、标准汤剂及中药配方颗粒的鉴别方法，包括以下步骤：制备供试品溶液、对照品溶液；将其注入液相色谱‑质谱仪进行检测，得到离子流色谱图；蚂蟥多肽包含氨基酸序列如SEQIDNo.1所示的肽段和氨基酸序列如SEQIDNo.2所示的肽段；质谱仪选择mz双电荷601→630、601→743和mz三电荷475→589、475→662作为检测离子对，进行检测；若在离子流色谱图中出现与氨基酸序列如SEQIDNo.1所示的肽段和SEQIDNo.2所示的肽段保留时间相一致的色谱峰，则待检测样品中含有蚂蟥药材、标准汤剂和或中药配方颗粒。本发明还公开了一种鉴别中成药中是否含有蚂蟥的方法。实施本发明，可有效鉴别蚂蟥及其制品。

本发明授权蚂蟥药材、标准汤剂、中药配方颗粒及中成药的鉴别方法在权利要求书中公布了：1.一种蚂蟥药材、标准汤剂及中药配方颗粒的鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤： 将待检测样品置于碳酸氢铵溶液中提取，收集提取液，加胰蛋白酶酶解，得到供试品溶液； 将蚂蟥多肽采用提取溶液提取，得到对照品溶液； 将供试品溶液、对照品溶液注入液相色谱‑质谱仪进行检测，得到离子流色谱图；其中，液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱长为100mm，内径为2.1mm，粒径为1.7μm~1.9μm，流动相A为乙腈，流动相B为含甲酸体积百分比为0.08％~0.12％的甲酸水溶液，洗脱方式采用梯度洗脱；所述梯度洗脱按下述程序进行： 0min~2min，流动相A从10→12%，流动相B为90%→88%； 2min~5min，流动相A为12%，流动相B为88%； 5min~10min，流动相A从12%→18%，流动相B从88%→82%； 10min~11min，流动相A从18%→90%，流动相B从82%→10%； 11min~13min，流动相A为90%，流动相B为10%； 质谱仪采用正离子模式进行多反应监测，选择mz双电荷601→630、601→743和mz三电荷475→589、475→662作为检测离子对，进行检测；质谱仪的检测条件包括：毛细管电压： 1.2kV~1.8kV；离子源温度：300℃～400℃；去溶剂气流量：850Lhr～950Lhr；气帘气流量： 15 Lhr～25Lhr；锥孔电压：10V‑35V；碰撞能量：20V‑35V； 其中，所述蚂蟥多肽包含氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的肽段和氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的肽段；其中，SEQ ID No.1的序列为EGQGSIAAAELR，SEQ ID No.2的序列为VFYENLDEEHK； 所述鉴别方法还包括采用特异性PCR鉴别方法对所述待检测样品进行检测的步骤： 提取待检测样品的基因组DNA； 以所述基因组DNA为模板，采用引物组合按照预设扩增程序进行PCR扩增体系扩增，根据扩增产物进行特异性鉴别；所述引物组合包括引物一和引物二，所述引物一的序列如SEQ ID NO.3所示；所述引物二的序列如SEQ ID NO.4所示；其中，SEQ ID NO.3的序列为TAATCATATTGCTTAGGTCATC，SEQ ID NO.4的序列为ATGAGGCACCAGCTATATG； 若PCR扩增产物中含有144bp的DNA片段，且在离子流色谱图中出现与氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的肽段和氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的肽段保留时间相一致的色谱峰，则待检测样品中含有蚂蟥药材、蚂蟥标准汤剂和或蚂蟥中药配方颗粒； 若PCR扩增产物中含有144bp的DNA片段，且在离子流色谱图中未出现与氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的肽段和氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的肽段保留时间相一致的色谱峰，则待检测样品中不含有蚂蟥药材、蚂蟥标准汤剂和或蚂蟥中药配方颗粒； 若PCR扩增产物中不含有144bp的DNA片段，则待检测样品中不含有蚂蟥药材、蚂蟥标准汤剂和或蚂蟥中药配方颗粒。

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