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龙图腾网获悉扬州大学申请的专利一种检测Ⅱ型鸡星状病毒抗体的Cell-ELISA试剂盒及制备方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116593697B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-17发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310386227.3，技术领域涉及：G01N33/569；该发明授权一种检测Ⅱ型鸡星状病毒抗体的Cell-ELISA试剂盒及制备方法是由钱琨;宋睿;钱昊天;秦爱建;邵红霞;叶建强设计研发完成，并于2023-04-11向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种检测Ⅱ型鸡星状病毒抗体的Cell-ELISA试剂盒及制备方法在说明书摘要公布了：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种检测Ⅱ型鸡星状病毒抗体的ELISA试剂盒及制备方法，运用感染Ⅱ型鸡星状病毒的LMH细胞进行Cell‑ELISA实验，进行Ⅱ型鸡星状病毒抗体的检测。该方法与新城疫病毒、禽流感病毒、鸡传染性贫血病毒、禽白血病毒、马立克病毒、鸡传染性法氏囊病毒的阳性血清无交叉反应性，说明该方法具有良好的特异性。利用全病毒感染的Cell‑ELISA方法检测待检鸡血清样品，并组装成用于测定血清中鸡星状病毒抗体的试剂盒。该试剂盒可用于Ⅱ型鸡星状病毒感染血清学诊断以及抗体的水平的监测、流行病学调查等，为Ⅱ型鸡星状病毒防制提供一种新型有效的检测手段。

本发明授权一种检测Ⅱ型鸡星状病毒抗体的Cell-ELISA试剂盒及制备方法在权利要求书中公布了：1.一种检测Ⅱ型鸡星状病毒抗体的Cell‑ELISA检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述检测试剂盒包含固定有感染Ⅱ型鸡星状病毒的LMH细胞的细胞微孔板，所述Ⅱ型鸡星状病毒序列的GenBank编号为MK746105.1，所述Ⅱ型鸡星状病毒为空斑纯化后的Ⅱ型鸡星状病毒；将空斑纯化后的Ⅱ型鸡星状病毒CAstVNJ1701毒株感染LMH细胞，24h后对细胞进行固定、洗涤和透化处理； 所述制备方法包括：将空斑纯化后的Ⅱ型鸡星状病毒CAstVNJ1701毒株感染LMH细胞后，Ⅱ型鸡星状病毒CAstVNJ1701毒株感染量为MOI＝3.0；对其进行RT‑PCR鉴定，采用的引物序列如下： 所述试剂盒还包括阳性对照、阴性对照、酶标试剂、样品稀释液、显色液及洗涤液；所述阳性对照为抗Ⅱ型鸡星状病毒的Balbc小鼠血清，所述阴性对照为ICR小鼠血清；所述酶标试剂为辣根过氧化物酶标记的山羊抗鸡IgG抗体及辣根过氧化物酶标记的山羊抗鼠IgG抗体，所述样品稀释液为含有3％FBS的PBS，所述显色液为TMB显色液，所述的终止液为2M H2SO4，所述洗涤液为含有0.05％Tween‑20的PBS；封闭液为3％FBS的PBS、封闭条件为37℃2h； 一抗血清稀释度为1:400、血清作用时间为37℃60min；二抗血清稀释度为1：20000、二抗作用时间为37℃60min；显色条件为37℃15min；所述LMH细胞系细胞浓度为3ⅹ104个细胞mL，96微孔细胞板，100μl孔；LMH细胞系在96微孔细胞板中培养14‑16h后加入CAstVNJ1701毒株感染，24h后弃培养上清，使用4％多聚甲醛固定细胞20min，用0.25％Triton‑X‑100PBS透化细胞，采用含0.05％吐温的PBST洗涤5次后，可用封口膜封住96微孔细胞板，放4℃储存备用。

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