东弘耀兴(广州)国际再生医学科技有限公司牛力峰获国家专利权
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龙图腾网获悉东弘耀兴(广州)国际再生医学科技有限公司申请的专利一种药用级PDRN及其制备方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120519450B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-10发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510662876.0,技术领域涉及:C12N15/10;该发明授权一种药用级PDRN及其制备方法是由牛力峰;姜亚丽;堵朋设计研发完成,并于2025-05-22向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种药用级PDRN及其制备方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种药用级PDRN及其制备方法,属于生物技术领域。包括以下步骤:1在预冷研磨缓冲液中对鲑鱼精巢组织进行研磨,得到匀浆液;2使用Forskolin对研磨匀浆液进行诱导;诱导的条件为:先加入Forskolin至8~12μM,4℃静置1~3小时;再升温至10~20℃,补加Forskolin至18~22μM和2mM谷胱甘肽,处理2小时;3经SDS‑氯化钠提取获得PDRN。
本发明授权一种药用级PDRN及其制备方法在权利要求书中公布了:1.一种药用级PDRN的制备方法,其特征在于,包括以下步骤: 1在预冷研磨缓冲液中对鲑鱼精巢组织进行研磨,得到匀浆液; 2使用Forskolin对研磨匀浆液进行诱导;诱导的条件为:先加入Forskolin至8~12μM,4℃静置1~3小时;再升温至10~20℃,补加Forskolin至18~22μM和2mM谷胱甘肽,处理2小时; 3经SDS-氯化钠提取获得PDRN; 所述SDS-氯化钠提取的方法为: ①向诱导后的300g细胞匀浆液中加入含质量分数5%SDS的TE缓冲液,定容至1800ml,55℃加热磁力搅拌1小时,得到裂解液; ②取1800ml裂解液,加入50ml4M的NaCl,1000rpm磁力搅拌20分钟,DNA溶解; ③再向溶液中加入110体积的质量分数为5%SDS溶液,搅拌至有白色蛋白质析出,4500rpm离心30min,收集滤液; ④滤液再加入110体积的质量分数为5%SDS溶液,混匀静置10min,4500rpm离心30min,收集滤液; ⑤在滤液中加入1.5倍体积的无水乙醇,搅拌混匀后,-20℃静置30分钟,捞取DNA; ⑥加入体积分数为75%的乙醇,剧烈晃动,充分洗涤,去乙醇,挤出白色沉淀中的液体; ⑦重复步骤⑤,获得白色沉淀。
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